[发明专利]重组杆状病毒及其用途

说明书

本发明内容关于一种可用以制备一类病毒颗粒(VLP)的重组杆状病毒，包含一启动子及一外源基因，其中该外源基因是用以编码该VLP的结构蛋白，所述结构蛋白选自由全部、部分病毒结构蛋白及其组合所组成的群组。本发明内容关于也关于一种藉由将所述重组杆状病毒转导至一蚊子细胞中以制备所述VLP的方法、一种将所述VLP用于制备一疫苗的用途，以及一种利用所述VLP以侦测一生物样本中一抗病毒的抗体的方法。

技术领域

本发明内容是关于预防疾病的领域。更具体来说，本发明内容是关于一种重组杆状病毒(baculovirus)，及其于制备疫苗以预防感染性疾病的用途。

背景技术

许多蚊媒病毒(例如登革病毒(dengue virus，DENV)、屈公病毒(chikungunyavirus，CHIKV)、兹卡病毒(zika virus，ZIKV)、黄热病毒(yellow fever virus，YFV)、西尼罗河病毒(West Nile virus，WNV)或日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus，JEV))对民众健康带来潜在致命的危险，并在许多国家中皆造成重大的经济损失。为维护民众健康及避免经济损失，一般会采取免疫接种作为避免蚊媒病毒感染的手段。而在疫苗选择方面，现今已有多种利用不同技术所制成的疫苗可供选择，例如减毒疫苗、灭活疫苗、类毒素疫苗、遗传工程疫苗及DNA疫苗等。其中，随着生物技术的日益精进，遗传工程疫苗的发展也越来越受到重视。在遗传工程疫苗的类别中，主要是亚单位疫苗，其是使用纯化的病毒蛋白或糖蛋白来作为疫苗的主要成分。此外，近年来也有发展以类病毒颗粒(virus likeparticle，VLP)作为主要成分的疫苗，由于不含天然虫媒病毒(arbovirus)的基因成分，可大幅提升疫苗的安全性。

为制备VLP的疫苗，一般来说可利用细菌、酵母菌、昆虫细胞、植物细胞、哺乳细胞或不含细胞的蛋白表达系统(cell-free protein systems)等不同表达系统来制备。为模拟人类宿主的细胞表面成分，使所制备的疫苗达到较佳的免疫功效，通常会以哺乳细胞的表达系统为首选。然而，哺乳细胞的表达载体在设计上及应用上复杂性相对较高。另外，为控制疫苗制备成本，会考虑选用昆虫细胞的表达系统。只是，目前常用的昆虫细胞的表达系统，是以衍生自草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)、粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)、家蚕(Bombyx mori)等的昆虫细胞为主。由于该些昆虫(非蚊类)并非直接对人传播蚊媒病毒的媒介，因此以该些细胞所表达的VLP来作为疫苗成分，其表面成分仍与最早期感染人类宿主的细胞表面成分(蚊源性)有所差距，例如细胞膜具有不同的糖化成分及脂质含量等，从而使疫苗去引发宿主免疫反应的能力受到限制。

有鉴于此，本领域现有技术有必要发展一种可更模拟最早期感染人类宿主的细胞表面成分的VLP来作疫苗，例如直接以蚊子细胞来表达VLP，使其更符合人类早期蚊媒病毒的感染结构，据以提升疫苗的免疫功效。

发明内容

为了给读者提供基本的理解，以下提供本发明的简要发明内容。此发明内容不是本发明的广泛概述，同时非用来识别本发明的关键/必需组件或勾勒本发明的范围。其唯一目的是以简化的概念形式呈现本发明的一些概念，以作为呈现于后文中更详细描述的序言。

本发明整体来说，是关于一种重组杆状病毒及其用途。该重组病毒可表达一外源基因，特别是可在蚊子细胞中表达该外源基因，且该外源基因可用以编码一VLP的结构蛋白，特别是一虫媒病毒的VLP，据以在蚊子细胞中制备该VLP。

此外，也可利用上述VLP来作为侦检试剂的用途。由于VLP仍维持天然病毒颗粒的外观型态以及抗原特性，因此其可保有对筛检疾病的灵敏性及特异性等效度，同时也可提升抗原保存的稳定度。并且，VLP不含天然虫媒病毒的基因成分，因此在制备VLP的过程中，可保护第一线实验操作者免于遭受虫媒病毒的感染。