[发明专利]一种早期胚胎光学相干层析图像对比的增强方法有效

专利信息
申请号: 201910478806.4 申请日: 2019-06-03
公开(公告)号: CN110484590B 公开(公告)日: 2020-11-13
发明(设计)人: 赵庆亮;黄雅丽;刘刚;黄豆豆;张小芬;林文珍;刘基嫣;严文豪;龚向莲 申请(专利权)人: 厦门大学
主分类号: C12Q1/02 分类号: C12Q1/02;G01N21/64;C12N5/073;B22F9/24;B22F1/00
代理公司: 厦门市首创君合专利事务所有限公司 35204 代理人: 张松亭;姜谧
地址: 361000 *** 国省代码: 福建;35
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摘要:
搜索关键词: 一种 早期 胚胎 光学 相干 层析 图像 对比 增强 方法
【权利要求书】:

1.一种早期胚胎光学相干层析图像对比的增强方法,其特征在于:包括如下步骤:

(1)从孕龄为9.5天和10.5天的小鼠的母体分离带有完整胎盘和卵黄膜的早期胚胎;

(2)将该早期胚胎置于包括DMEM培养基、大鼠血清、青霉素、链霉素、非必须氨基酸和谷氨酸的胚胎体外培养培养基中,于含有4-6% CO2的36-38℃的细胞培养箱中进行培养3-8h,该胚胎体外培养培养基中含有浓度为10-50μg /mL的纳米金棒;该纳米棒的长度为1-50nm,宽度为1-10nm,吸收的特征峰为780-820nm;其中DMEM培养基与大鼠血清的体积比为1:1-4

(3)将步骤(2)培养后的早期胚胎剥离卵黄膜、胎盘和羊膜后,依次进行光学显微镜拍照、OCT成像获取二维图像和3D扫描获取三维图像。

2.如权利要求1所述的增强方法,其特征在于:所述纳米金棒的制备方法包括如下步骤:

(1)制备金纳米颗粒种子液;

(2)将CTAB溶液与AgNO3混合,再加入HAuCl4、抗坏血酸、H2SO4和上述金纳米颗粒种子液,于29-32℃孵育15-25h,获得浓度为0.4-0.6mM/L的纳米金棒母液,该纳米金棒母液在使用前须通过超声分散均匀,再经离心沉淀完全后,除去上层还原剂,最后经双蒸水充分洗涤重悬。

3.如权利要求2所述的增强方法,其特征在于:所述CTAB、AgNO3、HAuCl4、抗坏血酸、H2SO4的摩尔比为0.8-1.2:0.8-1.2:0.8-1.2:8-12:45-55,CTAB溶液与所述金纳米颗粒种子液的体积比为100:0.2-0.3。

4.如权利要求2所述的增强方法,其特征在于:所述金纳米颗粒种子液是在CTAB和NaBH4存在的条件下通过还原HAuCl4而获得。

5.如权利要求4所述的增强方法,其特征在于:所述CTAB、NaBH4和HAuCl4的摩尔比为900-1000:5-7:20-30。

6.如权利要求5所述的增强方法,其特征在于:所述CTAB、NaBH4和HAuCl4的摩尔比为1000:6:25。

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