[发明专利]一种具有调节B淋巴细胞活性的羊乳酪蛋白水解肽及其制备方法

说明书

本发明公开了一种具有调节B淋巴细胞活性的羊乳酪蛋白水解肽，所述羊乳酪蛋白水解肽的序列如SEQ ID NO.1所示。制备具有调节B淋巴细胞活性的羊乳酪蛋白水解肽的方法包括羊乳酪蛋白的选取、二阶段酶水解羊乳酪蛋白和分离纯化等步骤。本发明选取高质量、高稳定性的羊乳酪蛋白，通过不同的生物酶混合物，在两阶段不同的酶反应条件下对羊乳酪蛋白进行水解反应，分离纯化得到高纯度的具有调节B淋巴细胞活性的羊乳酪蛋白水解肽，与现有的羊乳酪蛋白产品相比，不仅更加容易消化，而且具有明显的增强免疫功能，能够显著的增强B淋巴细胞活性（增强免疫球蛋白表达），在保健食品和功能性营养品中具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于营养品技术领域，具体涉及一种具有调节B淋巴细胞活性的羊乳酪蛋白水解肽及其制备方法。

背景技术

B淋巴细胞是人体免疫系统的重要调节因子，它的功能包括刺激反应，抗原呈递，分泌炎症因子和抗体，既可以通过细胞免疫，也可以通过体液免疫的方式进行免疫反应，帮助机体抵抗病原物质的入侵。不仅如此，B免疫细胞还有助于帮助机体组织创伤后修复，包括骨裂，皮肤创伤修复等。此外，B淋巴细胞还能显著地促进神经组织在疤痕组织下面和内部的增长，使这些修复的机体具有正常的生理功能。在老人，孩童，病人等特殊人群中，由于机体免疫功能的下降，因此通过膳食补充调节B淋巴细胞的活性对保持健康起着重要作用。

酪蛋白是乳制品中蛋白的主要成分，在牛乳中占总蛋白质的80—85％，在羊奶中酪蛋白含量稍低，为74—80％。酪蛋白为非结晶、非吸潮性物质，人体在食用乳清蛋白后，效用启动的较快，可以在健身运动前后食用，富含支链氨基酸，它可以在运动期间使蛋白在肌肉中穿梭，或是让它立即成效，当然因为消化的较快，所以在身体里也不会保持太久。另一方面，由于酪蛋白的溶解性显著低于乳清蛋白，食用酪蛋白可能造成消化不良反应。使用微生物或者生物酶在体外水解酪蛋白，增加其可溶性和易消化性是一种增加其营养价值的方法。

目前采用的水解酪蛋白的方法主要是通过胰蛋白酶水解法，碱性蛋白酶水解法或酸性蛋白酶水解法，得到牛乳酪蛋白水解产物，通常这些作为蛋白质/氨基酸补充剂进行营养产品开发。但是由于水解方法过于单一，得到的牛乳水解产物成份太复杂，因此造成产物调节B淋巴细胞免疫活性功能价值不高，有的甚至有副作用。羊乳作为一种成份明显不同于牛乳的酪蛋白，尚无对羊乳酪蛋白水解产品开发的应用，也无相应的功能产品可供选择，因此通过选择高质量的羊乳酪蛋白，优化酶水解方法，得到纯化的高效调节B淋巴细胞活性的小分子肽具有广阔的应用前景。

发明内容

本发明旨在针对现有羊乳水解酪蛋白水解物调节B淋巴细胞免疫功能产品的空白，研究羊乳酪蛋白的水解方法和水解条件，提供了一种具有调节B淋巴细胞活性的羊乳酪蛋白水解肽及其制备方法。本发明还应用这一具有调节B淋巴细胞活性的羊乳酪蛋白水解肽于营养品中，增强营养补充品的功能，增强服用者的机体免疫能力。

为了达到上述目的，本发明提供的技术方案为：

所述具有调节B淋巴细胞活性的羊乳酪蛋白水解肽，其特征在于，所述羊乳酪蛋白水解肽的序列如SEQ ID NO.1所示：缬氨酸-赖氨酸-谷氨酸-苏氨酸-蛋氨酸-缬氨酸-脯氨酸-赖氨酸(即，VKETMVPK)。

上述具有调节B淋巴细胞活性的羊乳酪蛋白水解肽的制备方法包括如下步骤：

(1)羊乳酪蛋白的选取：将选取的羊乳酪蛋白溶解于去离子水中，得到羊乳酪蛋白浓度为8—12g/L，优选为9—10g/L，更优选为10g/L的羊乳酪蛋白溶液；所述羊乳酪蛋白中α1酪蛋白的质量百分比含量≤15，α2酪蛋白的质量百分比含量为15—20％，β酪蛋白的质量百分比含量为43—51％，k酪蛋白的质量百分比含量为17—23％；