[发明专利]一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺

权利要求书

1.一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：包括以下步骤：

一、斜面菌种培养：取菌膜未破裂松茸菌子实体，用质量份数为70％乙醇反复进行表面灭菌后，用无菌镊子和刀子取下一小块，接入于斜面培养基中密封好，放入培养箱，在25℃恒温条件下培养，待菌丝长满斜面后，转入下一步培养；

二、液体种子培养：将步骤一中培养好的斜面菌种接入摇瓶玉米粉液体种子培养基中，于25℃，190r/min摇床培养8天，无菌过滤得菌丝体，用无菌水冲洗干净，加四倍体积生理盐水及少量玻璃珠稀释、打碎菌丝球、摇匀，得液体种子。

三、发酵培养：将发酵罐高压灭菌,在无菌的条件下将灭菌后的玉米粉液体发酵培养基加入到发酵罐中,接着将步骤二培养好的液体种子转接入发酵罐中，通入经过0.45μm的无菌滤膜过滤的空气进行培养，进行发酵培养一周。

四、菌丝干重：将培养液用40目滤网过滤，分离得到菌丝体和发酵液，菌丝体经去离子水冲洗数次后，真空抽滤，于60℃烘箱中，烘干至恒重，用分析天平称重，得松茸菌丝体干物质。

2.根据权利要求1所述的一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：所述斜面培养基包括：玉米粉40g/L、葡萄糖10g/L、琼脂20g/L及余量水，PH自然。

3.根据权利要求1所述的一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：所述摇瓶玉米粉液体种子培养基包括：玉米粉20g/L、葡萄糖5g/L、磷酸二氢钾2g/L、硫酸镁0.5g/L、维生素B0.15g/L及余量水。

4.根据权利要求1所述的一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：所述玉米粉液体发酵培养基包括：玉米粉40g/L、麸皮15g/L、蔗糖10g/L、葡萄糖10g/L、蛋白胨5g/L、磷酸二氢钾2.5g/L、维生B0.05～0.1g/L、硫酸镁0.5g/L、维生素B0.15g/L及余量水。

5.根据权利要求2所述的一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：所述斜面培养基的制备方法为：先将玉米粉在60℃水浴条件下溶解1h，经细筛过滤后取其滤液，并向滤液中加入琼脂，再次加热煮沸，并不断搅拌至琼脂完全溶解，接着将加入葡萄糖，不断搅拌至葡萄糖完全溶解，最后加水定容，即成为制备好的培养基，将其趁热分装入试管内，灭菌后摆放斜面，即得斜面培养基。

6.根据权利要求3所述的一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：所述摇瓶玉米粉液体种子培养基的制备方法为：先将玉米粉在60℃水浴条件下溶解1h，经细筛过滤后取其滤液，称取蔗糖、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B，加入到滤液中，搅拌至溶解，并加水定容；

接着在摇瓶中放一粒转子，培养基冷却后放入摇瓶中，将瓶口和胶皮管口用棉塞塞紧，并用牛皮纸包扎，将摇瓶放入高压锅灭菌将摇瓶放入高压锅灭菌中，在温度121℃，压力在0.15MPa灭菌40min，待培养基冷却后接种。

7.根据权利要求4所述的一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：所述玉米粉液体发酵培养基的制备方法为：先将玉米粉和麸皮在60℃水浴条件下溶解1h，经细筛过滤后取其滤液，称取蔗糖、葡萄糖、蛋白胨、磷酸二氢钾、硫酸镁、维生素B，加入到滤液中，搅拌至溶解，将溶解后的液体加入发酵罐中，再加入热的消泡剂消泡，打开气泵搅拌，加水至视镜中线定容，即得玉米粉液体发酵培养基，所述消泡剂为豆油。

8.根据权利要求1所述的一种利用玉米粉发酵生产松茸菌丝体的生产工艺，其特征在于：所述发酵罐转速为150r/min，通气率0.8V/V·min，内罐压力稳定在0.08～0.1MPa,恒温25℃的条件下培养。