[发明专利]ZBTB20蛋白或其特异性抗体在贲门癌检测试剂盒中的应用

说明书

本发明涉及一种贲门癌血清标志物，具体来说，该标志物为ZBTB20。应用ZBTB20特异性抗体制备免疫组化试剂盒，利用免疫组化法筛查诊断贲门癌，其检测结果与病理活检诊断结果完全一致，表明该试剂盒具有极高的特异性和敏感性。相应的，将ZBTB20蛋白作为抗原包被于ELISA检测试剂盒中，利用该ELISA试剂盒检测人体血清中的自身抗体含量来检测贲门癌，具有特异性好、灵敏度高、操作方便等优点。本发明为有效判断贲门癌提供了新的科学依据，有望实现贲门癌的早发现及早治疗，应用前景广阔。

技术领域

本发明属于生物医学和分子生物学技术领域，涉及ZBTB20作为贲门癌血清标志物的用途。

背景技术

贲门癌是我国北方最常见的上消化道恶性肿瘤之一，其定义为食管胃交界线下约2cm范围内的腺癌，又称食管-胃交界腺癌。历史上，我国曾把贲门癌纳入食管癌，上世纪八十年代以后，按照病理分类又把贲门癌划分到胃癌，但贲门癌有相对独立的病因、临床表现和病理，应该当做一种独立的肿瘤用于临床和研究。

癌症的发病是多种因素参与、涉及多次病变的过程，贲门癌也不例外。研究显示，贲门癌的发生主要与环境和遗传因素有关。癌症的分子生物学研究目前已经取得很大的进步，癌基因和抑癌基因的发现成为攻克癌症道路上的重要成果，研究发现各种因素导致癌基因、抑癌基因和细胞凋亡基因的表达改变，破坏了贲门粘膜上皮细胞增殖和凋亡的动态平衡，导致了贲门癌的发生。早期发现肿瘤是治疗肿瘤、提高肿瘤术后生存率的重要途径之一，早期贲门癌患者术后年生存率可达90%，而中期和晚期患者预后相对较差。所以，贲门癌患者预后的决定性因素就是早期发现、早期诊断、早期治疗。现代医学科学的进步和先进的医疗手段对于早期阶段的肿瘤，特别是原位肿瘤的治疗具有显著的疗效。因此，现代医学已经把重点聚焦于肿瘤的早期发现，使肿瘤在发展到晚期之前得到有效地治疗。人们期望探索和建立一种敏感性高、特异性强的贲门癌早期诊断指标以及贲门癌预后预测指标，并利用这些指标作为指导治疗和判断预后的依据。

随着医学科技的高速发展，越来越多的先进医疗器械被用于贲门癌的检查。目前临床贲门癌的检测方法主要有临床检查、胃镜检查、影像学检查、病理学检查和血清学检查。胃镜检查和病理学检查有创；影像学检查的灵敏度有限，且价格贵；血清学检查方法简便，价格低，患者容易接受，因此寻找贲门癌相关血清标志物十分重要。血清标志物是反映肿瘤存在的化学类物质。它们或不存在于正常成人组织而仅见于胚胎组织，或在肿瘤组织中的含量大大超过在正常组织里的含量，它们的存在或量变可以提示肿瘤的性质，借以了解肿瘤的组织发生、细胞分化、细胞功能，以帮助肿瘤的诊断、分类、预后判断以及治疗指导。理想的血清标志物应有以下特征：(1)灵敏度高；(2)特异性好；(3)能对肿瘤进行定位；(4) 与病情严重程度、肿瘤大小或分期有关；(5)能监测对肿瘤治疗的效果 ；(6) 监测肿瘤的复发；(7)预测肿瘤的预后。

蛋白质组学是以蛋白质组为研究对象，研究细胞、组织或生物体蛋白质组成及其变化规律的科学。这个概念最早是在1994年，是由Marc Wikins首先提出的新名词。蛋白质组的研究不仅能为生命活动规律提供物质基础，也能为众多种疾病机理的阐明及攻克提供理论根据和解决途径。通过对正常个体及病理个体间的蛋白质组比较分析，我们可以找到某些疾病特异性的蛋白质分子，它们可成为新药物设计的分子靶点，或者也会为疾病的早期诊断提供分子标志。

锌指蛋白ZBTB20是ZBTB锌指蛋白亚家族的新成员，与已知的BCL6和PLZF同源。通过基因打靶小鼠和疾病人群研究，学者们发现ZBTB20在肝脏、胰岛、神经系统和免疫系统等多个器官与系统中具有重要生理学功能，是个体发育、学习记忆、痛觉感受、糖脂代谢等正常生理过程所必需的调节分子。ZBTB20表达或功能异常可导致个体发育障碍，与智障、肿瘤和代谢性疾病等多种重大疾病的病理生理过程密切相关。作为甲胎蛋白基因的主要转录抑制因子，ZBTB20在出生后肝脏甲胎蛋白基因的表达失活中发挥了关键性作用，且与肝癌预后密切相关，但其在贲门癌中发挥的生物学功能鲜有报道。

发明内容