[发明专利]一种不动杆菌3P29培养基及发酵方法有效
申请号: | 201910482836.2 | 申请日: | 2019-06-04 |
公开(公告)号: | CN110343634B | 公开(公告)日: | 2020-06-26 |
发明(设计)人: | 刘新;李雅华;赵方贵;安东;咸洪泉 | 申请(专利权)人: | 青岛农业大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12R1/01 |
代理公司: | 青岛鼎丞智佳知识产权代理事务所(普通合伙) 37277 | 代理人: | 韩耀朋;曲志乾 |
地址: | 266000 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 不动 杆菌 p29 培养基 发酵 方法 | ||
本发明公开了一种不动杆菌3P29发酵培养基及其发酵方法,每升所述发酵培养基包括以下各组分:蛋白胨4~20g;碳源2~20g;K2HPO4 1~5g;MgSO4 0.1~1g;其余为无菌水;其中,所述碳源为葡萄糖、甘露醇、麦芽糖、淀粉、玉米粉、甘油、蔗糖或乳糖。所述发酵方法包括以下步骤:S1、将低温保存的不动杆菌3P29按1~10%的接种量接到LB培养基中,25~30℃,100~200r/min培养12~36h后,得到种子液;S2、将种子液接种到如上所述的发酵培养基中进行培养,得到发酵产物。上述发酵培养基是针对不动杆菌3P29的生长及营养需求特点而设计,不仅菌体产量高,并且其配方简单,成本低廉,配置简便,极大地降低了不动杆菌3P29的发酵成本,便于向工业化生产推广。
技术领域
本发明涉及微生物发酵领域,尤其涉及一种不动杆菌3P29培养基及发酵方法。
背景技术
不动杆菌3p29是从土壤中分离得到的一株具有解磷、解钾、固氮、促生作用的多功能菌株,可以作为菌剂或菌肥应用,前期已申请专利。
作为菌剂或菌肥生产应用的前提,便是对菌株进行发酵。而微生物菌肥或菌剂的质量,在于所含活菌的数量和质量,如何提高发酵产物所含活菌的数量和质量,关键在于发酵工艺的优化。发酵工艺优化包含培养基的优化和培养条件的优化。
鉴于本发明的不动杆菌自身独特的发酵性状,目前市面上并无合适的发酵方法和培养基,用于不动杆菌3P29的高效发酵。
因此,现有发酵方法有待提高。
发明内容
针对上述问题,本发明提供了一种针对不动杆菌3P29设计的发酵方法,该方法简单,易操作、不动杆菌3P29的产量高,以解决现有发酵方法无法高效培养、发酵不动杆菌3P29的问题。
为实现上述发明目的,本发明采用下述技术方案予以实现:
一种不动杆菌3P29发酵培养基,每升所述发酵培养基包括以下各组分:
蛋白胨4~20g;
碳源2~20g;
K2HPO4 1~5g;
MgSO4 0.1~1g;
其余为无菌水。
其中,所述碳源为葡萄糖、甘露醇、麦芽糖、淀粉、玉米粉、甘油、蔗糖或乳糖,几种碳源对不动杆菌3P29的生长没有显著差异,可根据市场情况选择碳源。
所述不动杆菌3P29,为申请人之前从土壤中发现的新菌株,分类命名为不动杆菌(Acinetobacter.sp),于2018年11月7号保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号是CGMCC 16716,保藏地址为:北京市朝阳区北辰西路1号院3号。目前还未发现针对不动杆菌3P29的发酵培养基。
经过申请人的大量研究,发现所述不动杆菌3P29对营养需求量较低,主要需求是碳源和氮源,而其对微量元素的需求具有特异性,主要表现为对Mg 离子和K离子的需求。结合这些发现,申请人进行大量实验设计和不断尝试后,发现:仅由蛋白胨4~20g/L、碳源2~20g/L、K2HPO4 1~5g/L和MgSO4 0.1~1g/L相互配合形成的发酵培养基,具有以下优点:一方面,上述发酵培养基针对不动杆菌3P29的生长及营养需求特点而设计,能完全满足不动杆菌 3P29的生长需求,相比于其他多种培养基(如图1所示),本发明提供的发酵培养基培养得到的不动杆菌3P29的生物量得到显著提高;另一方面,上述发酵培养基的组分简单,成本低廉,配置简便,极大地降低了不动杆菌3P29的发酵成本,便于向工业化生产推广。
优选地,每升所述发酵培养基包括以下各组分:
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