[发明专利]一种利用微生物处理大麻花叶提高大麻二酚提取率的工艺

权利要求书

1.一种利用微生物处理大麻花叶提高大麻二酚提取率的工艺，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1，利用工业大麻植株分离一种或多种真菌，进行培养繁殖；利用该真菌对工业大麻花叶进行生物发酵处理，有效破坏细胞壁，从而提高大麻花叶的细胞通透性；

步骤2，对发酵处理后的大麻花叶进行提取，富集含有大麻二酚的粗提浸膏；

步骤3，利用硅胶柱层析将大麻二酚从浸膏中分离纯化出来；

步骤4，采用结晶手段进一步纯化大麻二酚，真空干燥，得到高纯度CBD晶体。

2.根据权利要求1所述的一种利用微生物处理大麻花叶提高大麻二酚提取率的工艺，其特征在于，所述步骤1真菌培养繁殖具体包括：所述真菌是以大麻植株的叶、皮以及根部组织为原料， PDA平板培养基中无菌培养24-96小时，在无菌操作台上，从平板上挑取白色菌丝体，置入试管斜面，继续培养48-120小时，大麻花叶粉碎至10-200目。

3.根据权利要求1所述的一种利用微生物处理大麻花叶提高大麻二酚提取率的工艺，其特征在于，所述步骤1生物发酵具体包括：真菌占花叶重量的0.5-10%，搅拌均匀后，移入发酵床进行固体发酵，发酵温度20-55℃，发酵时间为24-96h，发酵终点根据HPLC检测目标物的含量变化情况决定。

4.根据权利要求1所述的一种利用微生物处理大麻花叶提高大麻二酚提取率的工艺，其特征在于，所述步骤2具体包括：提取法包括溶剂提取、超临界二氧化碳提取、亚临界提取法。

5.根据权利要求1所述的一种利用微生物处理大麻花叶提高大麻二酚提取率的工艺，其特征在于，所述步骤3具体包括：硅胶目数60-400目，流动相可以采用正己烷-乙酸乙酯、石油醚-乙酸乙酯、正己烷-二氯甲烷、石油醚-二氯甲烷，或其中几种溶剂的混合溶剂，层析方式可以采用常压或加压，洗脱方式可以采用等度洗脱或梯度洗脱，洗脱液分段浓缩，浓缩温度35-60℃，压力10-100KPa；

进一步，正己烷：乙酸乙酯体积比10:1-2:1，压力范围在常压到7bar之间。

6.根据权利要求1所述的一种利用微生物处理大麻花叶提高大麻二酚提取率的工艺，其特征在于，所述步骤4具体包括：结晶溶剂有甲醇、乙醇、丙酮、正己烷、正庚烷、水，或其中几种溶剂的混合溶剂，溶剂是待结晶粗品质量比的0.5-2倍，结晶方式有常温过饱和结晶及-35℃-2℃低温结晶。

7.根据权利要求4所述的一种利用微生物处理大麻花叶提高大麻二酚提取率的工艺，其特征在于，所述提取法具体包括：溶剂提取法，提取溶剂包括甲醇、乙醇、乙酸乙酯、正己烷、石油醚或以上几种溶剂所组成的混合溶剂，1-6倍的溶剂使用量，提取次数1-3次，提取时间1-3h，提取温度25-60℃；超临界二氧化碳提取：萃取釜压力15-30MPa，萃取温度为35-60℃、萃取时间为0.5-3小时；解析釜温度为35-50℃、解析压力为1-15MPa。