[发明专利]猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗及制备方法在审
| 申请号： | 201910485142.4 | 申请日： | 2019-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN110327460A | 公开（公告）日： | 2019-10-15 |
| 发明（设计）人： | 王春来;刘思国;李刚 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心);哈尔滨维科生物技术有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/116 | 分类号： | A61K39/116;A61K39/09;A61K39/102;A61P31/04 |
| 代理公司： | 北京商专永信知识产权代理事务所(普通合伙) 11400 | 代理人： | 方挺;黄谦 |
| 地址： | 150069 黑龙江省哈尔滨市香坊*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 亚单位疫苗 副猪嗜血杆菌病 副猪嗜血杆菌 猪链球菌病 猪链球菌 抗原 抗原蛋白 融合蛋白 小鼠 制备 交叉保护 疫苗研究 传统的 灭活苗 血清型 广谱 激发 | ||
1.一种猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗，其特征在于，其含有副猪嗜血杆菌抗原蛋白AfuA、OppA2、CdtB、OppA，以及猪链球菌抗原MRP和SLY；优选地含有副猪嗜血杆菌融合蛋白AfuA-OppA2、融合蛋白CdtB-OppA两种抗原，以及猪链球菌抗原蛋白MRP和SLY两种抗原。
2.根据权利要求1所述的猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗，其特征在于，所述各抗原蛋白分别为递呈表达形式。
3.根据权利要求2所述的猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗，其特征在于，分别将编码所述蛋白的基因构建成表面递呈表达载体，进而制备成表面递呈表达的重组菌，培养得到菌液后混合获得所述疫苗，其进一步优选的表面递呈表达载体为pMD为出发载体。
4.根据权利要求1至3任一项所述的猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗，其特征在于，其中对于各抗原蛋白在使用时的浓度，分别为0.1-0.5mg/mL，优选为0.2-0.4mg/mL，最优选为0.3mg/mL。
5.根据权利要求1至3任一项所述的猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗，其特征在于，其还包括佐剂，优选为水包油佐剂、聚合物和水佐剂、油包水佐剂、氢氧化铝佐剂、维生素E佐剂，更优选为ISA201VG。
6.根据权利要求3所述的猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗，其特征在于，所述重组菌是革兰氏阳性菌或革兰氏阴性菌，更优选为BL21(DE3)菌。
7.根据权利要求3所述的猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗，其特征在于，制备成适合于通过肌内、皮内或皮下给药的剂型，优选为皮下给药的剂型。
8.根据权利要求1至3任一项所述的猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗，其特征在于，对于副猪嗜血杆菌融合蛋白AfuA-OppA2、融合蛋白CdtB-OppA两种抗原，其中的连接肽为GGGGS。
9.根据权利要求1至8任一项所述的猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗的制备方法，其特征在于，分别将编码所述蛋白的基因构建成表面递呈表达载体，进而制备成含有所述表达载体的重组菌，培养得到菌液后混合获得所述疫苗。
10.一种根据权利要求9所述的猪链球菌病-副猪嗜血杆菌病二联亚单位疫苗的制备方法，其特征在于，将佐剂优选为ISA201VG按等质量比的比例与所述菌液混合后，进行乳化得到所述疫苗。
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