[发明专利]三裂棉细胞质雄性不育恢复基因的分子鉴定方法有效
| 申请号： | 201910485678.6 | 申请日： | 2019-06-05 |
| 公开（公告）号： | CN110184378B | 公开（公告）日： | 2022-03-15 |
| 发明（设计）人： | 邢朝柱;冯娟娟;吴建勇;张梦;郭立平;戚廷香;张学贤;王海林;唐会妮;乔秀琴 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院棉花研究所;中国农业科学院西部农业研究中心 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 济南诚智商标专利事务所有限公司 37105 | 代理人： | 韩百翠 |
| 地址： | 455000 河*** | 国省代码： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 三裂棉 细胞质 雄性不育 恢复 基因 分子 鉴定 方法 | ||
1.InDel分子标记引物在三裂棉细胞质雄性不育恢复系及杂交种的种子纯度鉴定方面的应用，所述InDel分子标记引物是根据三裂棉细胞质雄性不育恢系与陆地棉参考基因组相比，三裂棉细胞质雄性不育恢系染色体ChrD05上有如SEQ ID NO.1所示的36bp核苷酸序列缺失设计，能够通过琼脂糖凝胶电泳鉴定棉花单株是否含有三裂棉细胞质雄性不育恢复基因，其上游引物为：5’-AATCCCACCTCTCCTCTCCAA-3’；下游引物为：5’-TCTATGACGGCAATCGCAACA-3’；所述陆地棉参考基因组记载在http://mascotton.njau.edu.cn/info/1054/1118.htm。
2.InDel分子标记引物在三裂棉细胞质雄性不育恢复系材料的选育方面的应用，所述InDel分子标记引物是根据三裂棉细胞质雄性不育恢系与陆地棉参考基因组相比，三裂棉细胞质雄性不育恢系染色体ChrD05上有如SEQ ID NO.1所示的36bp核苷酸序列缺失设计，能够通过琼脂糖凝胶电泳鉴定棉花单株是否含有三裂棉细胞质雄性不育恢复基因，其上游引物为：5’-AATCCCACCTCTCCTCTCCAA-3’；下游引物为：5’-TCTATGACGGCAATCGCAACA-3’；所述陆地棉参考基因组记载在http://mascotton.njau.edu.cn/info/1054/1118.htm。
3.一种三裂棉细胞质雄性不育恢复基因的分子鉴定方法，其特征是：
1)采用InDel分子标记引物对待测的三裂棉细胞质雄性不育三系棉花材料的基因组DNA进行PCR扩增；
所述InDel分子标记引物是根据三裂棉细胞质雄性不育恢系与陆地棉参考基因组相比，三裂棉细胞质雄性不育恢系染色体ChrD05上有如SEQ ID NO.1所示的36bp核苷酸序列缺失设计，能够通过琼脂糖凝胶电泳鉴定棉花单株是否含有三裂棉细胞质雄性不育恢复基因，其上游引物为：5’-AATCCCACCTCTCCTCTCCAA-3’；下游引物为：5’-TCTATGACGGCAATCGCAACA-3’；所述陆地棉参考基因组记载在http://mascotton.njau.edu.cn/info/1054/1118.htm；
2)对PCR扩增产物进行琼脂糖电泳分析；
PCR产物电泳结果一条带，如果片段长度为275bp的条带，则为不含三裂棉细胞质雄性不育恢复基因的材料；如果片段长度为239bp的条带，则为三裂棉细胞质雄性不育恢复基因位点纯合的恢复系材料；
如果PCR产物电泳结果同时出现两条，片段长度为275bp和239bp的两条带，则为三裂棉细胞质雄性不育恢复基因杂合位点的材料。
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