[发明专利]鸡传染性喉气管炎基因工程亚单位疫苗在审
申请号: | 201910485896.X | 申请日: | 2019-06-05 |
公开(公告)号: | CN110201154A | 公开(公告)日: | 2019-09-06 |
发明(设计)人: | 曹文龙;孔迪;滕小锘;易小萍;张大鹤 | 申请(专利权)人: | 苏州世诺生物技术有限公司 |
主分类号: | A61K39/245 | 分类号: | A61K39/245;A61P31/22;C12N15/39;C12N15/85;C07K14/065 |
代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 王锋 |
地址: | 215123 江苏省苏州*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基因工程亚单位疫苗 鸡传染性喉气管炎 免疫组合物 免疫原性 制备 鸡传染性喉气管炎病毒 疫苗 核酸分子编码 核苷酸序列 生物反应器 天然蛋白质 表达水平 核酸分子 悬浮培养 疫苗生产 抗原性 无血清 致病性 可用 蛋白 | ||
1.一种免疫组合物,其特征在于包含:
采用序列如SEQ ID NO:1所示的核酸分子或者与SEQ ID NO:1的核苷酸序列95%以上相同的核酸分子编码的鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白。
2.根据权利要求1所述的免疫组合物,其特征在于,所述的鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:2的全长氨基酸序列95%以上相同的氨基酸序列。
3.权利要求1或2所述免疫组合物的制备方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
S1、将密码子优化后的鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白基因克隆到对应的真核表达载体中,得到与鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白编码基因对应的重组质粒载体;
S2、将所述重组质粒载体转染CHO细胞,通过培养、筛选、驯化得到对应的悬浮稳定高度表达的CHO细胞株;
S3、对S2步骤中的CHO细胞株进行发酵培养,纯化后得到对应的重组鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白;
S4、将S3步骤中的重组gD蛋白加入到佐剂中,即得所述免疫组合物。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述真核表达载体类型选自pSV2-GS,pCI-GS和pcDNA4-GS中的任意一种。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述CHO细胞包括CHO-DG44细胞、CHO-DX11细胞、CHO-K1细胞和CHO-S细胞中的任意一种。
6.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,步骤S3中,发酵培养中使用的培养基为传代培养基。
7.一种核酸分子,其用于编码鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白,包含SEQ ID NO:1的顺序核苷酸序列或者与SEQ ID NO:1的核苷酸序列95%以上相同的顺序核苷酸序列。
8.一种蛋白,其选自由以下组成的组:
SEQ ID NO:2的氨基酸序列或者与SEQ ID NO:2的全长氨基酸序列95%以上相同的氨基酸序列。
9.权利要求1或2所述的免疫组合物用于生产用于在受试动物中诱导针对鸡传染性喉气管炎病毒抗原的免疫反应的药剂的用途。
10.权利要求1或2所述的免疫组合物用于生产用于预防动物受鸡传染性喉气管炎病毒感染的药剂的用途。
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