[发明专利]前列腺癌的标志物组及其应用

说明书

本发明公开了一种前列腺癌的标志物组，以及该标志物组在制备用于前列腺癌诊断的试剂或试剂盒中的应用。本发明还提供了一种用于检测基因mRNA标志物组的试剂组合；一种基因mRNA标志物组的检测方法；一种前列腺癌分型系统。本发明利用特定基因的mRNA标志物，实现了前列腺癌的筛查、受试者发生前列腺癌的风险评估、前列腺癌的分型和/或预后预测，提高了诊断和检测的灵敏度、特异性和准确性，避免了过度治疗和前列腺穿刺活检。

技术领域

本发明属于生物医学领域。具体地，本发明涉及前列腺癌的标志物组及其应用。

背景技术

在世界范围内，前列腺癌发病率位居男性恶性肿瘤第2位。近30年来前列腺癌发病率在大部分国家都有明显的升高，目前前列腺癌在美国的发病率已经超过肺癌，在危害男性健康的肿瘤中排第一。我国前列腺癌发病率较低，但近年来呈显著上升趋势。自2008年起，前列腺癌已成为泌尿系统发病率最高的恶性肿瘤。国内前列腺癌发病率城乡差异较大，特别是大城市的发病率更高。2017年中国前列腺癌确诊患者是122万，近五年的复合增长率在12％左右。前列腺癌早期不易被发现，约65％～75％的前列腺癌患者在确诊时病情已发展至晚期。早期前列腺癌患者进行根治手术或者放疗，5年的总生存率可以接近100％；而一旦到了晚期，5年的生存率只有28％。

前列腺特异抗原PSA是由前列腺上皮细胞产生的类丝氨酸蛋白酶的激肽释放酶。目前，血清PSA指标筛查是前列腺癌检测的最常用的方法。与经直肠指检和经直肠超声发现可疑病灶相比，作为独立变量的PSA是较好的预测因子。实际上，没有公认的PSA水平的上限。PSA是一个连续参数，数值越高，前列腺癌的可能性越大。但是尽管血清中PSA的水平较低，男性仍有隐匿性前列腺癌的可能。

尽管PSA被认为是医学界较好的前列腺癌标志物，但是由于以下原因PSA被认为是不完美的标志物：PSA具有器官特异性，但是不具有癌症特异性，高假阳性率和低特异性导致大量不必要的前列腺活检和心理问题。因为前列腺癌的特征是高度异质性的病程，部分患者会发展成具有扩散和转移的致命性癌症，需要积极治疗，而另一些患者的前列腺癌是非转移性、进展缓慢，可以通过主动监测进行监控。而tPSA不能区别是原位性癌症还是进展性癌症。因此，通过液体活检，来找出预测前列腺癌病理分型的标志物是目前临床上需要解决的问题。找出低危原位性的前列腺癌患者，从而避免过度治疗和前列腺穿刺活检。

迄今为止，已有多项关于验证前列腺癌患者外周血中游离的核酸水平的研究。这些研究大部分集中在寻找循环核酸，来区分前列腺癌和良性前列腺增生患者或健康对照。然而，许多游离核酸在一些研究中表现出相互矛盾的结果。因此，游离核酸的分析被认为是一种不可重复的方法。近来，已经发现在外周血中含有细胞外囊泡，最近研究认为，细胞外囊泡富含的核酸是来源于细胞，包含罕见但高度特异性的核酸生物标记，而且细胞外囊泡还能保护其中的核酸免受血液中核酸酶的降解，因此，细胞外囊泡中的核酸的分析会优于外周血中游离核酸的分析。

细胞外囊泡中最重要的一种囊泡叫做外泌体。外泌体(Exosome)是一类直径30-150nm，具有完整膜结构的细胞外囊泡，主要负责细胞间的物质运输和信息传递。外泌体在1983年被发现，1987年正式被定名为exosome，最早被认为是细胞的废弃物。后来的研究表明，外泌体中包裹有细胞特异的核酸、蛋白与脂类，并能作为信号分子向其他细胞传递信息。更进一步的研究发现，外泌体在很多生理病理过程中扮演着重要的角色，如免疫中的抗原呈递，肿瘤的生长与迁移等。所有细胞都会分泌外泌体，但是肿瘤细胞会分泌出比正常细胞数量更多的外泌体。因此，血液外泌体可以一定程度上表征肿瘤的发展情况。

发明内容

本发明人通过大量研究发现，利用特定基因的mRNA表达水平，可以进行前列腺癌诊断，包括前列腺癌的筛查、受试者发生前列腺癌的风险评估、前列腺癌的分型和/或预后预测。

因此，本发明的目的之一在于提供前列腺癌的标志物组，所述标志物组包括基因RELA、NDUFB4、EHD3、PFKL和RAN的mRNA。另外，本发明的目的之一在于提供上述标志物组的应用。