[发明专利]细胞冲洗容器、细胞收集冲洗方法及系统

说明书

本发明公开了细胞冲洗容器、细胞收集冲洗方法及系统，方法包括预处理；细胞冲洗容器中设有过滤膜将其内腔分为上腔和下腔，负压装置使上腔形成负压以使待冲洗细胞悬液处于上腔内；将上腔内液体抽滤至下腔内；向上腔加入生理盐水重悬细胞；反复多次后直至液体符合标准后，向上腔内定量加入预冷的细胞保存液并重悬细胞，完成细胞冲洗。细胞收集冲洗系统，包括细胞冲洗容器、生理盐水容器、细胞悬液容器、空气滤器、第一负压装置和第二负压装置。本发明的有益效果是：通过负压吸引结合过滤膜的方式对细胞悬液进行置换以完成细胞富集和冲洗，不仅冲洗速度快，而且相比传统离心和自然沉降的方式而言富集和冲洗效率更高，同时对细胞损伤更小。

技术领域

本发明涉及细胞培养技术领域，具体地指一种细胞冲洗容器、细胞收集冲洗方法及系统。

背景技术

随着科技的进步，细胞治疗逐步在向临床发展，也推动了细胞培养和过程处理技术的发展。细胞在经过大规模培养后，必须要富集，并且将培养液，营养液等成分冲洗净，同时要保持其活性。现有的细胞冲洗方法通常采用离心和自然沉降的方式，离心方式虽然效率高但对细胞损伤很大，而自然沉降虽然损伤细胞小，但冲洗效率非常低，因此，如何高效的对细胞进行富集和清洗并对细胞伤害降到最低，是亟需解决的问题。

发明内容

本发明的目的在于克服现有方法和装置存在的细胞富集和冲洗效率低，对细胞伤害大的问题，提供一种细胞冲洗容器，包括一个罐体，所述罐体内设有将其内腔分为上下两个腔的过滤器；所述罐体外接有液体输入管路、负压接入管路、废液收集管路；

所述过滤器为碗状，其碗底为无孔结构的实心圆盘，碗侧壁上布置有过滤膜；

所述液体输入管路在罐体内的端部靠近所述实心圆盘布置；所述负压接入管路接入端位于罐体顶部，所述废液收集管路的接入端位于罐体底部。

进一步，所述液体输入管路在罐体内的端部与所述实心圆盘的垂直距离小于1CM。

进一步，所述过滤膜为聚醚砜材料制成，孔径为300nm。

本发明还提出了一种细胞收集冲洗系统，包括细胞冲洗容器、生理盐水容器、细胞悬液容器、空气滤器、换向阀、第一负压装置和第二负压装置；

所述细胞冲洗容器，包括一个罐体，所述罐体内设有将其内腔分为上下两个腔的过滤器；所述罐体外接有液体输入管路、负压接入管路、废液收集管路；所述过滤器为碗状，其碗底为无孔结构的实心圆盘，碗侧壁上布置有过滤膜；所述液体输入管路在罐体内的端部靠近所述实心圆盘布置；所述负压接入管路接入端位于罐体顶部，所述废液收集管路的接入端位于罐体底部；

所述生理盐水容器、细胞悬液容器、空气滤器分别与换向阀相连，且通过换向阀和液体输入管路连接所述细胞冲洗容器；

所述负压接入管路与第一负压装置相连，所述废液收集管路与第二负压装置相连。

进一步，所述过滤膜为聚醚砜材料制成，孔径为200～400nm。

进一步，还包括细胞保存液容器、流出液收集容器、第一阀门和第二阀门；所述细胞保存液容器通过换向阀与液体输入管路连通；所述流出液收集容器与废液收集管路或第二负压装置或下腔连通；所述第一阀门设置在负压接入管路上；所述第二阀门设置在废液收集管路上。

本发明还提出一种HepG2细胞收集冲洗方法，包括如下步骤：

S1、通过管路向细胞冲洗容器内加入预冷至0～4℃的生理盐水，以润湿设置在细胞冲洗容器内将其腔体分为上腔和下腔的过滤膜，并预冷管路和细胞冲洗容器，实现预处理；

S2、向完成步骤S1预处理后的细胞冲洗容器的上腔内定量加入待冲洗细胞悬液，并通过负压装置使上腔内形成100～300mmHg的负压以使待冲洗细胞悬液处于上腔内；