[发明专利]一种共培养提高微藻油脂产率的方法

权利要求书

1.一种共培养提高微藻油脂产率的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)种子液培养：以BG-11培养基分别培养两株微藻，待微藻生长至对数生长期后期收集藻细胞，作为种子液；

(2)共培养：在BG-11培养基中同时接入步骤(1)培养的两株微藻种子液，进行共培养；

(3)共培养微藻的收集：将培养至稳定期的共培养藻液通过离心及冷冻干燥的方法获得干藻粉。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述两株微藻种类为单针藻Monoraphidium sp.(FACHB-1821)和胶树小球藻Heveochlorella sp.(MK829186)。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)和步骤(2)中的培养条件为：光照强度2500～4000lux，摇床转速为150r/min，培养温度为25±1℃，维持体系pH为6.5～7.5。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述BG-11培养基成分为NaNO₃ 1.5g/L，K₂HPO₄ 0.04g/L，MgSO₄·7H₂O 0.075g/L，CaCl₂·2H₂O 0.036g/L，柠檬酸0.006g/L，柠檬酸铁胺0.006g/L，EDTANa₂ 0.006g/L，Na₂CO₃ 0.02g/L，A5微量元素1.0mL/L，诱导剂(植物激素黄腐酸FA25mg/L，褪黑素MT 10μmol/L，茴香醚BHA2mg/L)。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述A5微量元素由H₃BO₃ 2.86g/L，MnCl₂·4H₂O 1.81g/L，ZnSO₄·7H₂O 0.222g/L，Na₂MoO₄·2H₂O 0.39g/L，CuSO₄·5H₂O 0.079g/L，Co(NO₃)₂·6H₂O 0.0494g/L配置而成。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，加入葡萄糖C₆H₁₂O₆ 10g/L作为碳源。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中共培养体系内两株微藻的初始细胞总密度为1.00×10⁶～4.00×10⁶cells/mL，两株微藻的密度比例为1:3～3:1。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述的冷冻干燥的方法为将藻液置于-80℃冰箱(Thermo Scientific 900 Series)冷冻过夜，然后置于真空冷冻干燥机(SIM FD5-12)中冷冻干燥48h得干藻粉。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，将步骤(3)中所得藻粉称重后，用Bligh&Dyer法测定油脂含量，再通过计算获得油脂产率。