[发明专利]用于药物代谢检测的羧酸酯酶抑制剂制剂

说明书

本申请提供了一种用于药物代谢检测的羧酸酯酶抑制剂制剂，所述羧酸酯酶抑制剂制剂由苯甲基磺酰氟和氯化钙组成，该羧酸酯酶抑制剂制剂抑制率高，且不受抗凝血剂肝素的影响，可以与肝素配合制成血液保存剂。

技术领域

本申请属于药物代谢领域和生物血液样本检测领域，具体地，本申请提供了一种用于药物代谢检测的羧酸酯酶抑制剂制剂，所述羧酸酯酶抑制剂制剂由苯甲基磺酰氟和氯化钙组成，该羧酸酯酶抑制剂制剂抑制率高，且不受抗凝血剂肝素的影响，可以与肝素配合制成血液保存剂。

背景技术

羧酸酯酶(carboxylesterase，CES)属于B族酯酶家族，广泛分布于各种生物中，动物中的羧酸酯酶可以分为CES1-CES5五个家族，以肝脏、肠和肺中含量最高。

羧酸酯酶是一种能催化酯键、酰胺键和硫酯键断裂的水解酶，其作用底物广泛(羧酸酯酶的水解特性尚未研究清楚)，除了执行解毒外源毒素等生物自身的生理功能外，羧酸酯酶在药物代谢中也起到重要作用，羧酸酯酶可以水解大量含酯键、酰胺键和硫酯键的药物或前药，包括血管紧张肽转化酶抑制剂如替莫普利、西拉普利、喹那普利，抗肿瘤药如伊利替康、喜明替康、卡培他滨，麻醉药如、利多卡因、丁卡因、布比卡因、普鲁卡因、可卡因、海洛因。

包括人在内的多数哺乳动物血浆中均存在羧酸酯酶，在研究上述药物以及其他含酯键、酰胺键和硫酯键的已知或未知药物的代谢时，必需考虑血浆中的羧酸酯酶影响，一般考虑取血样后尽快加入羧酸酯酶抑制剂如双(对硝基苯基)磷酸酯(BNPP)，苯甲基磺酰氟(PMSF)，氟化钠等羧酸酯酶抑制剂不可逆地抑制羧酸酯酶活性，其中双(对硝基苯基)磷酸酯(BNPP)由于超过99％的高抑制效率成为首选抑制剂(ZL201010260758.0，Wadkins RM等，Discover y of novel selective inhibitors of human intestinal carboxylesterasefor the am elioration of irinotecan-induced diarrhea:synthesis,quantitativestructure-ac tivity relationship analysis,and biological activity，Mol.Pharmacol，2004年，第65卷，第6期)。苯甲基磺酰氟(PMSF)作为一种广谱的酯酶/蛋白酶抑制剂，虽然对羧酸酯酶有抑制效果，但抑制率不足无法满足药物代谢检测水平的需求，一般仅用作胆碱酯酶抑制剂/提取蛋白时的蛋白酶抑制剂。

药物或药物代谢物的测定一般需要以离心后获得的血浆作为检测样本，离心过程所需的离心机以及洁净的移液环境操作虽然在实验室和医院中容易获得，但是对于条件较差的采血点或移动采血方式，特别是需要在这些不良条件下由少量操作人员大量处理样本时，一般就需要先采用抗凝管采血抑制血液凝固等待到实验室或医院批量进行处理。

申请人在进行药物代谢研究时发现，使用常用的肝素、EDTA抗凝剂采血管采血时加入双(对硝基苯基)磷酸酯(BNPP)抑制羧酸酯酶保存血液样本会很大程度地降低羧酸酯酶抑制效果(抑制效果降低50％左右)，导致样品中相应药物检测结果严重失真。而不使用抗凝采血管采血，则必须对每份样本在10几分钟的时间内完成加入BNPP，混合，离心、取血浆这一系列工作，这在实验室条件下处理少量样本时并无问题，但是在样本量大，特别是需要在较差的条件(如实验动物饲养地、住院患者/行动不便患者采血时)下处理大量样本时，给实验组织带来很大的困难。而现有的其他羧酸酯酶抑制剂如苯甲基磺酰氟、氟化钠、哌唑嗪、噻吩甲酰三氟丙酮由于抑制率，干扰后续检测等原因并不适合此类检测。

因此，本领域有需要开发一种能有效抑制羧酸酯酶活性并与不受抗凝血剂影响的新型羧酸酯酶抑制剂。

发明内容