[发明专利]一株分离自母乳的乳双歧杆菌M8及其应用

说明书

本申请提供一株分离自母乳的乳双歧杆菌M8，其微生物保藏编号为CGMCC No.16070，所述乳双歧杆菌M8在低温发酵乳、低温褐色乳酸菌饮料以及鲜榨果汁中均可保持较高的活菌数，并且，后酸化程度较低，从而在产品货架期期间能维持较高的活菌数，可以保证产品的稳定性，起到良好的调节肠道菌群的作用中能维持较高的活菌数。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，特别涉及一株分离的乳双歧杆菌M8及其应用。

背景技术

益生菌是指通过摄取适当的量、对食用者的身体健康能发挥有效作用的活性微生物，其中，双歧杆菌是定植于人体肠道内的益生菌，是健康人群肠道内的优势菌群。人体肠道菌群中双歧杆菌的结构组成不仅与宿主的年龄、性别相关，还与宿主的饮含结构和生活方式等相关。双歧杆菌属于放线菌科双歧杆菌属，革兰氏阳性，无鞭毛、不运动，不形成芽子，厌氧；双歧杆菌菌体形状各异，较典型的有V形、Y形、勺状、曲状，双歧杆菌主要存在于人类和哺乳动物的肠道内。

母乳是大自然的恩赐，是妈妈赠予宝宝的最好礼物。母乳喂养在新生儿喂养中得到大力的提倡，不仅因为母乳中的抗体以及适合新生儿的营养物质是其它来源乳制品无法模拟与替代，而且母乳中还蕴含着母亲能够给予新生儿的健康有益的人体共生菌群。这些菌群结构复杂，是传统培养方式无法获取的重要微生物资源。生理母乳喂养是先喂细菌再喂乳汁的过程，这个过程能够促进婴儿肠道正常菌群的建立，不仅利于母乳的消化吸收，而且能够促进免疫系统成熟，预防过敏的发生。因此，系统的分析健康妈妈母乳与婴儿肠道中的菌群结构，并从中筛选有益微生物的研究有着重大的意义。

发明内容

本发明的目的之一是提供一株乳双歧杆菌的新菌株Bifidobacterium LactisM8，所述乳双歧杆菌Bifidobacterium Lactis M8是2017年从84份中国健康妇女母乳中分离所得364株乳酸菌和双歧杆菌中，筛选出的一株具有潜在益生特性的乳双歧杆菌。

本发明提供的乳双歧杆菌（Bifidobacterium Lactis）M8已于2018年7月9日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心保藏，保藏号为CGMCC No. 16070，为简便描述，以下将乳双歧杆菌（Bifidobacterium Lactis）M8简称为“乳双歧杆菌M8”。

本申请人发现，所述乳双歧杆菌M8具有良好的耐受人体消化道不良环境的能力，例如，具有优异的胃肠液耐受性和胆盐耐受性，具备作为益生菌的基本条件，可以更好地发挥其益生作用。

进一步地，所述乳双歧杆菌菌株M8具有增强免疫抵抗作用、能够提高肠道菌群多样性以及增加肠道菌群稳定性等益生特点。

本发明所提供的乳双歧杆菌M8是从84份内蒙古健康妇女母乳中分离的364株乳酸菌和双歧杆菌中筛选出的一株耐酸和耐胆盐的益生菌。

在一种可实现的方式中，本发明的乳双歧杆菌M8通过如下方法分离得到的：

将一株新分离的菌种接入到MRS液体培养基，于37℃培养24h，继代培养3代，恢复菌株活力，对菌液进行倍比稀释，得到10^-1~10^-7稀释梯度，分别吸取200μL 10^-4、10^-5、10^-6、10^-7梯度稀释液，均匀涂布于MRS固体培养基平皿内，37℃厌氧培养48~72h。挑取形态、大小、颜色不同的单克隆接种于液体培养基中，于37℃恒温培养箱培养24h。待菌株生长良好后，进行革兰氏染色、镜检，保存分离株，并提取菌株基因组DNA用于后续测定分析，经过分析后命名为乳双歧杆菌M8。