[发明专利]一种测定奇亚籽中DPPH自由基清除能力的方法

说明书

本发明公开了一种测定奇亚籽中DPPH自由基清除能力的方法，属于抗氧化能力检测领域。本发明方法以DPPH法测定样品中实际DPPH自由基清除能力作为参考值，同时以特定的光谱采集方法扫描样品，确定主成分数，选择光谱预处理方法，基于偏最小二乘法，构建光谱信息和参考值之间的校正模型。利用已建立的校正模型便可以快速得到各成分的含量信息，且通过内部交叉验证法验证已建立的模型具有较高的预测精确度。本发明方法适用于奇亚籽中DPPH自由基清除能力的定量分析，方法准确，省时高效。

技术领域

本发明涉及一种测定奇亚籽中DPPH自由基清除能力的方法，属于抗氧化能力检测领域。

背景技术

奇亚籽(Chia seed)原产于墨西哥南部和一些北美洲地区，是薄荷类植物芡欧鼠尾草(Salvia Hispanica L.)的种子，由于芡欧鼠尾草适应在墨西哥及北美洲地区海拔约1200m的高原荒漠地区生长，且国内并没有此物种的繁殖地，目前国内市场上的奇亚籽均依赖于进口，样品收集不易。

人体中的自由基与许多疾病的生成发展有密切关系，人们利用人工合成的抗氧化剂来清除体内的自由基和治疗疾病。而奇亚籽除了普通维生素E、维生素C抗氧化剂以外，还富含具有很强抗氧化能力的酚类和黄酮类物质，如迷迭香酸、原儿茶酸乙酯、杨梅素、槲皮素和山奈酚等。奇亚籽具有高抗氧化作用，如抗氧化、抑菌、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、神经保护等多种活性功能，也广泛应用于医药、食品、化妆品等方面。

鉴定天然产物中抗氧化物质含量高低对抗衰老药物的研究开发上具有重要作用。DPPH(2,2.二苯基-1-苦肼基自由基)分析法是一种筛选自由基清除剂的简便方法，用分光光度法对自由基清除程度进行定量分析。是一种较为传统的用以评价实验样品抗氧化能力的方法。该方法费时费力，需注重细节，以保证实验数据的准确性。所以寻求一种快速、有效、无损的检测方法对奇亚籽DPPH自由基清除能力的测定具有重要的现实意义。

近红外光谱(Near Infrared Spectroscopy，NIRS)是基于可见光和中红外光谱之间的一段光谱，波长范围为780nm-2526nm，属于分子振动光谱，是含氢基团(C-H、N-H、O-H)振动的倍频与合频吸收，是获取含氢基团特征信息的一种有效载体。随着化学计量学的加入，近红外光谱技术在农产品等食品检测中有着较多的应用，它的特点是：检测成本低，快速，无损害待检测样品，可实现在线检测，是一种成熟的食品品质分析技术。这为将该技术用于奇亚籽DPPH自由基清除能力实时分析和监控成为一种可能。

目前已有利用近红外光谱检测DPPH自由基清除能力的报道，比如山东大学的李采怿(基于近红外光谱的生药醇提取物抗氧化性预测，光谱学与光谱分析)偏最小二乘算法，计算预测了37种生药药材甲醇提取物的抗氧化活性，并采用1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)法进行了验证，选择5775-6102cm^-1处为建模谱区；然而，该方法虽然可以较为准确的测定茶叶中的DPPH自由基清除能力，但是由于物质环境不同，与DPPH自由基清除能力相关的吸收波段差异较大，利用该方法中的波段数据无法建立准确的线性校正模型。此外，丁晓晓(色谱法和近红外光谱法结合化学计量学用于一些食品及中草药的质量分析，南昌大学)选择了6个特征变量分别为700nm、772nm、912nm、1528nm、1950nm和2400nm建立总抗氧化能力(DPPH法)模型，模型较好，可用于实际样品的粗测；然而，该方法并未明确光谱数据如何构建校正模型，且该方法中的波段同样也无法有效、准确的预测奇亚籽中DPPH自由基清除能力。因此，开发一种快速、有效、无损且准确的奇亚籽DPPH自由基清除能力检测方法是十分重要的。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有奇亚籽中DPPH自由基清除能力在分析过程中费时费力，检测周期长，样品破坏性测试，效果不佳的缺点，提供一种基于近红外光谱的奇亚籽中DPPH自由基清除能力准确的建模方法和简便快速的检测方法，以评价奇亚籽的质量，用于奇亚籽贸易品质的鉴别。