[发明专利]ADORA3在制备高级别浆液性卵巢癌诊断及预后试剂盒中的应用

说明书

本发明公开了检测ADORA3蛋白的试剂在制备高级别浆液性卵巢癌诊断、化疗敏感性和预后判断的试剂盒中的应用，属于分子生物学与生物医学技术领域。本发明以ADORA3蛋白作为诊断、治疗和预后判断的标志物，根据ADORA3在正常卵巢组织和卵巢浆液性囊腺瘤表达为阴性或者弱表达，但在高级别浆液性卵巢癌中是高表达的，并且这种表达强度和临床治疗的耐药和预后指标紧密相关，可以辅助鉴别诊断高级别浆液性卵巢癌，并对高级别浆液性卵巢癌治疗效果和预后进行判断。同时根据不同的表达强度和高级别浆液性卵巢癌预后之间的相关性，对患者进行分层处理，为开发更有效的个体化化疗药物提供理论依据，具有重要的临床应用和药物开发价值。

技术领域

本发明涉及分子生物学与生物医学技术领域，具体涉及检测ADORA3蛋白的试剂在制备高级别浆液性卵巢癌诊断、化疗敏感性和预后判断的试剂盒中的应用。

背景技术

全世界每年约有24万妇女被诊断患有卵巢癌，死亡率几乎是乳腺癌的三倍，III期或IV期患者5年生存率不到25％，使卵巢癌成为最致命的妇科恶性肿瘤。卵巢癌分为三大类：上皮细胞癌、生殖细胞癌和特异性间质细胞瘤。绝大多数卵巢癌是上皮性卵巢癌(Epithelial ovarian cancers，EOCs)，上皮性卵巢癌主要分为两大组织类型：I型和II型肿瘤。I型肿瘤包括各种低级别浆液性、粘液性、子宫内膜样、透明细胞癌，往往生长缓慢，通常来自可识别的癌前病变。相比之下，II型肿瘤的特点是高级别和快速进展的疾病。高级别浆液性卵巢癌(Highgrade serous ovarian carcinoma，HGSOC)是最常见的II型肿瘤，约占所有卵巢癌的75％。不幸的是，它也是最具侵略性的。目前还没有有效和特异性高的早期预测高级别浆液性卵巢癌的指标和方法。即使肿瘤细胞已经在腹腔内广泛扩散转移也缺乏特异性症状而无法早期发现和诊断，因此，大多数女性初次诊断为卵巢癌时已经进展到疾病晚期，预后很差。其中远处转移和治疗后复发是临床治疗效果差的根本性原因。

卵巢癌是多因素多基因综合作用导致的一种复杂性疾病，每一种组织类型均有不同的分子水平起源，甚至同一种组织类型内部也存在着分子起源的不同。这导致分子和细胞行为、临床表现和预后存在着天壤之别，而目前临床只能根据病理分期作为治疗方案和预后判断依据，这种依据是完全脱离分子生物学基础，无法提供有效的分层个性化治疗的细胞学行为判断依据，导致诊断和治疗效果不尽人意。实际工作中急需更精准的标志物将患者分为高风险和低风险类型，从而可以采取有效的个性化治疗方案，提高治疗效果，改善预后。

目前卵巢癌的分子标记物包括两种层面的分子，核酸和蛋白质。核酸类标记物包括基因拷贝数变异(CNV)，微卫星不稳定(MSI)，碱基突变(Mutation)，单核苷酸多态性(SNP)等，近年的研究也包括miRNA的改变，但这些大部分只能作为患病易感性的预警，和细胞行为的相关性相去甚远，临床应用价值不大。蛋白质是基因表达的终产物，可以直接发挥功能，改变细胞的生物学行为和对周围环境的直接反应，比如肿瘤的发生发展，对治疗手段的反应，因此蛋白水平的研究成果可以直接和有效的提供具有临床指导价值的分子标记，满足卵巢癌分子水平的分类诊断和预后判断的需要，对卵巢癌的个性化治疗和改善预后具有重要价值。但目前为止尚未有明确的有效的研究成果，无法达到临床需要的特异性和精准性。

腺苷受体亚型属于G蛋白偶联受体(GPCR)家族，参与多种细胞内信号通路和生理功能。腺苷A3受体(ADORA3)与GPCR(Gi)的抑制亚单位结合，抑制腺苷酸环化酶，减少cAMP的产生。腺苷受体可以在不同的组织中表达，具有不同的生理和病理作用，参与抑制组织损伤中的中性粒细胞脱粒，参与神经的保护和神经退行性变，也可能介导细胞增殖和死亡。有文献报道在非小细胞肺癌、乳腺癌以及白血病细胞中存在ADORA3蛋白的异常表达，其和p53等抑癌基因的作用途径有关，在肿瘤的发生发展中起着重要的作用。但目前为止尚未见在高级别浆液性卵巢癌中的研究。

发明内容