[发明专利]一种微生物限度方法适用性检查方法、系统及设备

权利要求书

1.一种微生物限度方法适用性检查方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.制备第一计数培养物，所述第一计数培养物至少包括第一试验组、第一菌液组、第一供试品对照组；对所述第一计数培养物进行培养；对所述第一计数培养物中的菌落进行计数，并根据计数结果得到第一试验组菌回收率；

b.若所述第一试验组菌菌回收率满足第一条件，进入以下步骤g；否则进入以下步骤c；

c.制备第二计数培养物，所述第二计数培养物至少包括第二试验组、第二菌液组、第二供试品对照组；对所述第二计数培养物进行培养；对所述第二计数培养物中的菌落进行计数；并根据计数结果得到第二试验组菌回收率；

d.若所述第二试验组菌回收率满足第一条件，则进入以下步骤g；否则进入以下步骤e；

e.制备第三计数培养物，所述第三计数培养物至少包括第三试验组、第三菌液组、第三供试品对照组、以及稀释剂对照组；对所述第三计数培养物进行培养；对所述第三计数培养物中的菌落进行计数，并根据计数结果得到第三菌试验组菌回收率、以及稀释剂对照组菌回收率；

f.若所述第三试验组菌回收率满足第一条件，稀释剂对照组菌回收率满足第二条件，则进入以下步骤g；否则确定所述微生物限度计数方法不适用；

g.制备第一控制菌培养物；对第一控制菌培养物进行培养；对所述第一控制菌培养物中的菌落进行计数，得到第一控制菌菌落数；

h.若所述第一控制菌数目满足第三条件，则完成所述微生物限度方法适用性检查，否则进入以下步骤i；

i.制备第二控制菌培养物；对第二控制菌培养物进行培养；对所述第二控制菌培养物中的菌落进行计数，得到第二控制菌菌落数；

j.若所述第二控制菌数目满足第三条件，则完成所述微生物限度方法适用性检查，否则确定所述微生物限度控制菌检查方法不适用；其中，

所述第一试验组的制备程序包括：取10mL的供试液与体积不超过所述供试液体积1％的菌液混合，混合液1mL/皿，注入至少3个平皿，再向每个所述平皿倾注培养基；

所述第一菌液组的制备程序包括：分别取与所述第一试验组相同体积的所述菌液注入至少3个平皿，再向每个所述平皿倾注培养基；

所述第一供试品对照组的制备程序包括：取供试液1mL/皿注入至少3个平皿，再向所述平皿倾注培养基；

所述第二试验组的制备程序包括：取10mL的供试液与体积不超过所述供试液1％的菌液混合，取0.1-0.5mL/皿混合液分别注入2-10个平皿，再向每个所述平皿倾注培养基；

所述第二菌液组的制备程序包括：分别取与所述第二试验组相同体积的所述菌液注入至少3个平皿，再向每个所述平皿倾注培养基；

所述第二供试品对照组的制备程序包括：分别取与所述第二试验组所述混合液相同体积的供试液注入2-10个平皿，再向所述平皿倾注培养基；

所述第三试验组的制备程序包括：至少两个薄膜过滤所述供试液与所述缓冲液的混合液，每个所述薄膜过滤所述供试液1mL及所述缓冲液100mL；过滤后，每个所述薄膜用200-600mL的所述冲洗液，分2-6次冲洗，最后一次的所述冲洗液中加入其中菌株数量不大于100cfu的所述菌液；每个冲洗后的所述薄膜菌面朝上地贴于已注入所述培养基的平皿上；

所述第三菌液组的制备程序包括：至少两个薄膜过滤所述菌液与所述冲洗液混合液，每个薄膜过滤与所述第三试验组相同体积的所述菌液和100mL的所述冲洗液；每个过滤后的所述薄膜菌面朝上地贴于已注入所述培养基的平皿上；

所述第三供试品对照组的制备程序包括：至少两个薄膜过滤所述供试液和所述缓冲液的混合液，每个所述薄膜过滤1mL的所述供试液和100mL的所述缓冲液；过滤后，使用200-600mL所述冲洗液，分2-6次冲洗所述薄膜；每个冲洗后的所述薄膜菌面朝上地贴于已注入所述培养基的平皿上；

所述稀释剂对照组的制备程序包括：使用至少两个薄膜过滤100mL的所述缓冲液；使用200-600mL的冲洗液，分2-6次冲洗所述薄膜，并在最后一次的冲洗液中加入与所述第三试验组相同体积所述菌液；将冲洗后的所述薄膜菌面朝上地贴于已注入所述培养基的平皿上；

所述第一控制菌培养物的制备程序包括，取所述供试液10mL，以及1mL的所述菌液，进行预培养后，得到的培养液接种入至少3个已注入所述培养基的平皿中；

所述第二控制菌培养物的制备程序包括，所述供试液10mL置于200mL所述缓冲液中，薄膜过滤，300-600mL所述冲洗液，分3-6次冲洗所述薄膜，最后一次所述冲洗液中加入1mL所述菌液；过滤后的所述薄膜置于所述培养基进行预配养，得到的培养液接种入已注入所述培养基的控制菌的平皿中；并且，

所述试验租菌回收率计算公式为：

试验组菌回收率＝[(试验组平均菌落数–供试品对照组平均菌落数)/菌液组平均菌落数]×100％；并且

所述第一条件为：需氧菌所有试验菌株的所述试验菌回收率≥50％，霉菌和酵母菌所有试验菌株的所述试验菌回收率≥50％；

所述稀释剂对照组菌回收率计算公式为：

稀释剂对照组菌回收率＝[(稀释剂对照组的平均菌落数/菌液组的平均菌落数)]×100％；并且

所述第二条件为：需氧菌所有试验菌株的所述试验菌回收率所述稀释剂对照组菌回收率在50％～200％之间；霉菌和酵母菌所有试验菌株的所述试验菌回收率在50％～200％之间；

所述第三条件为：所述控制菌培养物的菌落数大于0；其中

所述菌液中所述菌株浓度为10～100cfu/mL。