[发明专利]一种用于快速捕获或检测细胞的微流控芯片及方法在审
申请号: | 201910498067.5 | 申请日: | 2019-06-06 |
公开(公告)号: | CN110093254A | 公开(公告)日: | 2019-08-06 |
发明(设计)人: | 颜娟;朱福琳;田润 | 申请(专利权)人: | 上海海洋大学 |
主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C12N5/09;C12N1/02 |
代理公司: | 上海唯智赢专利代理事务所(普通合伙) 31293 | 代理人: | 吴瑾瑜 |
地址: | 201306 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 微腔结构 微流控单元 微流控芯片 鱼骨形结构 快速捕获 四面体 细胞 捕获 生物检测技术 食源性致病菌 捕获目标 目标细胞 体外培养 体外增殖 细胞富集 序列连接 循环细胞 存活率 低成本 亲和素 适配体 检测 富集 修饰 肿瘤 | ||
1.一种用于快速捕获或检测细胞的微流控芯片,其特征在于,其结构包括至少一组微流控单元,微流控单元的数量为4~8组,呈环形阵列排布;
每组微流控单元的结构包括相互连接的通道A和通道B,通道A和通道B为蛇形通道;包括直线通道和弧形通道。通道A和通道B的直线通道相互平行排布,相邻的直线通道的通过弧形通道相连;
通道A的一端开设有进样口I,进样口I位于微流控芯片的外侧;通道A与通道B的连接处设有进样口II,通道B的末端为出样口,出样口位于微流控芯片的内侧位置;
通道A和通道B的深度为80~200μm,宽度0.8~1.5mm;
通道A内设有多组鱼骨形结构单元;所述的鱼骨形结构单元位于通道A的直线通道内的顶部;每组鱼骨形结构单元包括多个相互平行的鱼骨;
每组鱼骨形结构单元包括6~12个鱼骨,以通道A的顶部为基准,鱼骨的深度为30~50μm,宽度为30~50μm;同组鱼骨形结构单元中,相邻鱼骨的间距为80~120μm;
鱼骨的结构包括鱼骨微槽A和鱼骨微槽B,鱼骨微槽A和鱼骨微槽B与通道A直线通道的夹角分别为30~60度,鱼骨微槽A与鱼骨微槽B之间的夹角为80~100度;鱼骨微槽A与鱼骨微槽B的长度不相等;
所有鱼骨的方向与流体的流动方向相同或相反;
同一直线通道上、流体前进方向上,鱼骨形结构单元鱼骨微槽A和鱼骨微槽B的长度以1:1.8~2.1和1.8~2.1:1的比例间隔分布;同一直线通道上,相邻的鱼骨形结构单元的之间的最短距离为80~120μm;
通道B内设有微腔结构,所述的微腔结构位于通道B的直线通道内壁的两侧。所述的微腔结构为圆柱体微腔结构,以80~120μm的相邻间距呈阵列依次分布,每个直线通道上的圆柱体微腔结构的数量随通道B直线通道的长度而变化;每个圆柱体微腔结构通过底部的矩形小通道连接到通道B直线通道。
通道B的圆柱体微腔结构的直径为80~200μm,深度为80~200μm。
2.根据权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述的圆柱体微腔结构中心轴垂直于微流控芯片及通道B直线通道的底部,并与所在的通道B直线通道流体方向垂直;
所述圆柱体微腔结构的直径为100μm,相邻圆柱体微腔结构的间距为100μm;矩形小通道的深度为35μm,宽度为35μm。
3.根据权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述通道A和通道B的深度为100μm,宽度1mm;进样口I、进样口II和出样口的直径为1mm;鱼骨的宽度为35μm,以通道A的顶部为基准,鱼骨的高度为35μm;同组鱼骨形结构单元中,相邻鱼骨的间距为100μm;同一直线通道上,相邻的鱼骨形结构单元的之间的最短距离为100μm;每组鱼骨形结构单元包括10个鱼骨,鱼骨的鱼骨微槽A和鱼骨微槽B之间夹角为90度,与通道A两侧的夹角分别为45度;同一直线通道上或者流体前进方向上,鱼骨形结构单元鱼骨微槽A和鱼骨微槽B的长度以1:2和2:1的比例间隔分布;所述微流控单元的数量为6组。。
4.根据权利要求1所述的微流控芯片,其特征在于,所述的通道A内修饰巯基。
5.根据权利要求1或所述的微流控芯片,所述的通道A内连接DNA四面体,且DNA四面体的一个顶点上用生物素修饰;DNA四面体的其余至少一个顶点上用酰胺类修饰,并通过迈克尔加成反应使DNA四面体固定在通道A的内表面。
6.根据权利要求5所述的微流控芯片,其特征在于,将识别/捕获目标细胞的特异性适配体序列通过亲和素固定在修饰有生物素的DNA四面体顶点上,将特异性适配体的序列连接到通道A内表面。
7.根据权利要求5或6所述的微流控芯片,所述的DNA四面体用生物素修饰的顶点、或者特异性适配体的序列上带有DNA限制内切酶位点。
8.根据权利要求7所述的微流控芯片,所述DNA限制内切酶选自EcoRI、EcoRV、BamHI、HindIII、XbaI、SalI、SacI、SacII、XhoI、NcoI。
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