[发明专利]一种类风湿性关节炎诊断标志物及其应用

说明书

本发明提供对RNase L或其片段为反应性的抗体在制备用于诊断类风湿性关节炎疾病的试剂中的用途。本发明还提供核糖核酸酶L基因作为生物标志物在制备用于诊断类风湿性关节炎疾病的试剂中的用途。RNase L在RA患者关节滑膜中显著高表达，且与TNFα的分泌正相关；RNase L基因敲除后，显著抑制了CIA小鼠模型发病率和关节炎评分，以上结果证明了RNase L促进RA的发生和发展。RNase L主要表达于巨噬细胞内，RNase L通过激活JAK/STAT1通路，促进巨噬细胞向促炎型M1方向分化，从而促进RA炎症反应。综上表明，RNase L可以作为类风湿性关节炎疾病的生物标志物。

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及一种RA诊断标志物及其应用。

背景技术

类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis，RA)是一种以慢性滑膜炎并侵蚀软骨，最终导致骨与关节破坏为特征的自身免疫性疾病，因病变呈持续、反复发作过程，致残率非常高，是临床难治的疾病，给患者家庭和社会带来沉重经济负担。最新报道未经治疗的患者两年致残率约为50％，三年致残率为70％，成为我国人群丧失劳动力和致残的主要病因之一。由于RA的发病差异性大，目前对于RA诊断的敏感性不高，有相当一部分早期的RA在临床诊断之前就出现了骨关节的破坏，因此有关RA病理机制的深入研究，进而为RA的早期、全面诊断一直受到医学界的持续关注。

RA患者的血清中发现自身抗体已经超过70年。目前RF和ACPA为临床RA患者诊断的重要辅助指标，也成为ACR/EULAR2015分类标准的一部分。遗憾的是RF并不是RA的特异性抗体，在高龄人群和其他自身免疫病中也会有RF的出现，而且健康人群中RF阳性者高达15％。纵然ACPAs是目前RA诊断相对特异的抗体，但仍有2％的健康人群ACPAs阳性，而且大约10％的ACPA阳性患者为非RA的其他系统炎症性疾病，如系统性红斑狼疮等。一项临床实验提示，RA患者中ACPA阳性/RF阳性率大约为47％，ACPA阴性/RF阴性率大约为28％。30％的ACPA阳性/RF阳性的临床疑似关节痛患者2年内并未发展位RA，因此，疑似关节痛和目前临床通用的自身抗体不足以准确识别即将发展为RA的患者。

RA的早期病变以滑膜炎症为主，主要表现为滑膜组织中的大量单核巨噬细胞和淋巴细胞的浸润，分泌大量的炎性细胞因子(如TNF-a、IL-1等)诱导滑膜组织中血管增生形成血管翳，进而侵蚀软骨和破坏骨组织，最终导致关节畸形和功能丧失。其中滑膜病变是RA发病机制的关键环节，也是临床治疗的主要靶向。因此，在RA疾病的早期，抑制滑膜炎症的发展是治疗RA的关键。

大量研究证实滑膜巨噬细胞是导致滑膜炎症的“触发器”。首先巨噬细胞贯穿于整个关节滑膜层的解剖分布位置更有利于其发挥介导滑膜炎的作用。其次，活化的滑膜巨噬细胞释放出大量的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β及IL-6等，一方面可直接诱发滑膜炎症，另一方面又可作为Th1、Th17等淋巴细胞与成纤维细胞的纽带，进一步诱导其他炎性因子的产生，最终导致血管翳形成及骨破坏等。值得关注的是，Haringman J等发现RA患者的滑膜巨噬细胞数量，不仅与关节破坏的程度成正比，还可预测RA关节破坏的进展，因此滑膜巨噬细胞被认为是反映RA疾病严重程度和疗效反应的最可靠生物标记物。可见滑膜巨噬细胞在RA滑膜炎疾病过程中具有中心作用，同时还可以作为治疗RA的一个理想靶点。

近年研究发现，RA患者中激活的M1表型巨噬细胞可通过分泌IL-6、IL-23等因子，诱导CD4+辅助T细胞的分化成Th1/17，后者释放GM-CSF，进一步刺激单核巨噬细胞分化成M1表型巨噬细胞。这种循环作用一方面大大的提高了促炎性细胞的数量，另一方面进一步减少了M2抗炎表型巨噬细胞和其他类型T细胞的产生，提示RA的滑膜炎症中M1表型巨噬细胞的异常增加是炎症发生的主要原因。Shardool Jain等的研究发现，通过抗炎性因子如IL-10靶向性调整关节滑膜中M1和M2的比例，可有效阻止滑膜炎性进程和关节破坏。由此可见，M1表型分化是巨噬细胞导致滑膜炎症的主要途径，有效调控巨噬细胞M1/M2分化平衡，为RA治疗的重要手段。