[发明专利]一种提高狄氏副拟杆菌冻干存活率的方法及应用

权利要求书

1.一种狄氏副拟杆菌冻干粉的制备方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)狄氏副拟杆菌的前处理，(2)冷冻干燥的预处理，(3)冷冻干燥；所述步骤(1)具体为：

a)将狄氏副拟杆菌单菌落接种到BHI培养液中培养；

b)将步骤a)所得培养液离心去上清液后，洗涤所获得的菌泥；

c)重悬洗涤后的菌体，获得菌悬液；

所述步骤(2)是在步骤c)的菌悬液中添加质量体积浓度为10-30％的蔗糖溶液作为保护剂，转移至冻干瓶；

(3)冷冻干燥。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，将菌悬液与蔗糖溶液混合，菌悬液与保护剂的体积比为1:2-2:1，菌悬液中含3×10¹⁰-5×10¹⁰CFU/mL狄氏副拟杆菌细胞。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(a)所述培养条件为：35-38℃静置培养10-30h。

4.如权利要求1～3任一所述的方法，其特征在于，步骤(a)中狄氏副拟杆菌的接种量为1-5％(V/V)。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，冷冻干燥条件为：在-55～-45℃下预冻3-5h，在-35～-25℃一次干燥17-19h，再升温到20～30℃，13-15h之后取出冻干瓶密封，得到干燥的菌粉。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(b)所述洗涤是用生理盐水洗涤两次，步骤(c)所述重悬是用生理盐水重悬。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(c)中将菌泥与生理盐水按照1:1(g/mL)的比例混合。

8.一种提高狄氏副拟杆菌冻干存活率的方法，其特征在于，是利用质量体积浓度为10-30％的蔗糖溶液作为冻干保护剂，将菌悬液与保护剂按体积比为1:2-2:1混合，菌悬液中含3×10¹⁰-5×10¹⁰CFU/mL狄氏副拟杆菌细胞。

9.权利要求1-8任一所述方法在制备益生菌产品中的应用。

10.权利要求1～7任一所述方法制备的益生菌产品。