[发明专利]乳白蛋白-油酸复合物在制备抑制肿瘤细胞能量代谢的药物中的应用

说明书

本发明公开了乳白蛋白‑油酸复合物在制备抑制肿瘤细胞能量代谢的药物中的应用。本发明发现α‑LA‑OA能够抑制肿瘤细胞的糖酵解过程，降低线粒体有氧呼吸过程对氧气的消耗量及ATP的产生量；另外还发现，α‑LA‑OA能够减弱HepG2细胞葡萄糖代谢途径中ATP的产生，从而达到抑制肿瘤细胞能量代谢的作用；利用HepG2肿瘤细胞模型证实，α‑LA‑OA能显著促进mTORC2靶蛋白Rictor、mSin1及Ser473‑Akt的表达，糖酵解途径中的多种酶的表达量显著降低。α‑LA‑OA能够激活mTORC2信号通路，抑制葡萄糖代谢途径中关键酶的活性，从而降低ATP的产生抑制肿瘤细胞的能量代谢。

技术领域

本发明属于生物技术领域，特别涉及乳白蛋白-油酸复合物(α-LA-OA) 在制备抑制肿瘤细胞能量代谢的药物中的应用。

背景技术

癌症是世界范围内的主要公共卫生问题。近年来虽然有关癌症的预防、治 疗研究进展迅猛，但其发病率亦居高不下，据报道，2006～2016年期间，全球 癌症的发病率增加了28％。因此，开发新型、有效的抗肿瘤药物仍是目前的 研究热点，针对肿瘤细胞的分子靶向药物更是得到了广泛关注。

α-乳白蛋白-油酸复合物(α-LA-OA)具有良好的抗肿瘤效果，其选择性杀 死肿瘤细胞而不影响健康的分化细胞的活性不仅在人胶质母细胞瘤和膀胱癌 的小鼠模型中得到验证，还在人皮肤乳头状瘤和膀胱癌患者身上得到了证实。 但现有研究并未曾评估α-LA-OA处理肿瘤细胞后，肿瘤细胞能量代谢的变化， 以及α-LA-OA处理肿瘤细胞后引起细胞能量代谢变化的机制。

发明内容

本发明的目的是以裸鼠异种移植瘤及人肝癌细胞(HepG2)为模型，研究 α-LA-OA对肿瘤细胞能量代谢的影响及其作用机制，为解析α-LA-OA的抗肿 瘤机制提供依据。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

一种乳白蛋白-油酸复合物(α-LA-OA)的制备方法，包括以下步骤：

将α-LA溶于pH8.0的磷酸缓冲液中，使α-LA的终浓度为1mM，然后加 入OA，其中，α-LA和OA的摩尔比为1：30，混匀后放入45℃恒温水浴摇床， 反应20min；4℃、12000×g离心15min，再将未与蛋白结合的OA剔除，置 于4℃保存，即得到所述α-LA-OA。

进一步的，所述乳白蛋白包括人α-如白蛋白和牛α-如白蛋白。

本发明的另一方面为：

所述的乳白蛋白-油酸复合物(α-LA-OA)在制备抑制肿瘤细胞能量代谢 的药物中的应用。

进一步的，所述肿瘤细胞为肝癌细胞。

进一步的，所述α-LA-OA通过抑制糖酵解和线粒体的有氧呼吸途径抑制 肿瘤细胞的能量代谢。

进一步的，所述α-LA-OA通过减弱HepG2细胞葡萄糖代谢途径中ATP 的产生，从而达到抑制肿瘤细胞能量代谢的作用。

进一步的，所述α-LA-OA通过激活mTORC2信号通路，抑制葡萄糖代 谢途径中关键酶的活性，从而降低ATP的产生抑制肿瘤细胞的能量代谢。

进一步的，所述关键酶包括己糖激酶Ⅱ、醛缩酶、丙酮酸激酶Ⅱ、乳酸脱 氢酶B、柠檬酸合成酶、乌头酸水合酶、异柠檬酸脱氢酶Ⅱ和琥珀酸脱氢酶A。

本发明相比现有技术的有益效果为：

1、本发明首先利用裸鼠异种移植瘤模型，体内探究α-LA-OA对糖酵解 过程及线粒体有氧呼吸过程的影响。结果显示，α-LA-OA能够抑制肿瘤细胞 的糖酵解过程，降低线粒体有氧呼吸过程对氧气的消耗量及ATP的产生量。 由此表明，α-LA-OA能够通过抑制糖酵解和线粒体的有氧呼吸途径抑制肿瘤 细胞的能量代谢；