[发明专利]一种用于检测肥胖和2型糖尿病的引物、探针组合物及其应用方法

说明书

本发明提供了用于检测肥胖和2型糖尿病的引物、探针组合物，包括针对ADRβ3基因上rs4994位点的引物和探针、针对CDKAL1基因上rs9465871位点的引物和探针，针对ADRβ3基因上rs4994位点的引物和探针包括：ADRβ34994的上游引物、ADRβ34994的下游引物；ADRβ34994的探针；针对CDKAL1基因上rs9465871位点的引物和探针包括：CDKAL1的上游引物；CDKAL1的下游引物；CDKAL1的探针。本发明提供一种检测便捷、准确率高、经济实惠的肥胖和2型糖尿病相关突变基因位点的检测方法；通过多组基因引物对样品DNA进行实时定量PCR扩增，并通过探针分型获取受检者的基因型，达到快速检测肥胖和2型糖尿病易感基因突变位点的效果。

技术领域

本发明涉及分子生物学检测领域，具体地说，涉及Q-PCR法检测肥胖和2型糖尿病易感基因的突变位点的扩增引物和探针及其应用。

背景技术

肥胖作为一种常见的营养代谢性疾病，是指机体脂肪总含量过多和（或）局部体脂含量过多，主要是由遗传和环境因素共同作用所形成的慢性代谢性疾病。随着生活方式的改变，肥胖的患病率呈快速上升趋势，并且已经成为全球性公共卫生问题。2002 年WHO 将肥胖列为造成人类疾病负担的全球一级风险因素之一，目前中国已经超越美国成为全球肥胖人口数最多的国家，因此预防肥胖症的流行也是未来一段时间世界各国面临的最大公共卫生挑战之一。

2型糖尿病是一种长期的代谢紊乱疾病，主要表现是高血糖、胰岛素抵抗和相对缺乏胰岛素。多由机体遗传因素和外界环境因素相互作用导致，在病发过程中由多基因参与、多步骤引发。此外，与肥胖队伍迅速扩大趋势一致的是，2型糖尿病人群也随之壮大。因此，目前肥胖已被看作是危害健康和发生糖尿病的主要危险因素。由于肥胖可引起胰岛素抵抗，也可造成胰岛素的分泌障碍，从而影响胰岛素调节血糖的作用，使血糖升高，进而发生糖尿病，因此肥胖或超重的人比体重保持正常的人更易患糖尿病。2型糖尿病的肥胖患者减轻体重不仅有利于血糖的控制，还可减少并发症的发生。因此，要想控制2型糖尿病及其相关并发症，解决肥胖问题势在必行。许多研究发现，肥胖患者的体型与2型糖尿病更具相关性，而且与肥胖有协同作用。因此提高人们对肥胖和2型糖尿病的认识，以及对其发病机理和防治的研究，已成为当今社会重要的健康问题。

肥胖和糖尿病的病因相当复杂，研究表明遗传因素在肥胖和糖尿病的发生机制中发挥着极为重要和关键的作用，并且研究还发现肥胖和糖尿病是多基因遗传病。随着肥胖候选基因研究的不断深入，目前已经发现超过600 多个基因位点与肥胖症的发生有关，得到广泛证实的与体重调节密切相关的基因如体脂量和肥胖症相关（FTO）基因、瘦素受体（LEPR）基因、黑皮质素-4受体（MC4R）基因、解偶联蛋白（UCP2）基因、β3-肾上腺素能受体（ADRB3）基因、过氧化物酶增殖活化受体γ（PPARγ2）基因等。同时，已报道的超过100多个2型糖尿病易感基因/位点，其中在不同种族和人群中得到反复验证的易感基因主要包括：细胞周期素依赖激酶（CDK）5 调节亚单位相关蛋白1类似物1CDK5（CDKAL1）、转录因子7类似物2（TCF7L2）、胰岛素样生长因子2mRNA结合蛋白（IGF2BP2）、内向整流钾通道亚家族成员11（KCNJ11）、褪黑素受体1B（MTNR1B）和肥胖基因（FTO）等。目前，仅针对肥胖或糖尿病展开检测，该方法只能提示某一患病风险。此外，其他基于测序的方法要求样本量多，耗时长，不方便灵活开展检测。基于此，本发明提供联合检测肥胖和2型糖尿病易感基因突变位点的引物和探针组合，采用Q-PCR探针法，检测高效、灵活，在一定程度上对肥胖和2型糖尿起到筛查作用，也对含有易感基因突变的受检者起到一定的提示作用。

发明内容

本发明提供联合检测肥胖和2型糖尿病易感基因突变位点的引物和探针组合，采用Q-PCR探针法，检测高效、灵活，在一定程度上对肥胖和2型糖尿起到筛查作用，也对含有易感基因突变的受检者起到一定的提示作用。