[发明专利]一种石竹属花卉中的内源香气成分的分离和鉴定方法

说明书

本发明属于植物成分检测技术领域，具体涉及一种石竹属花卉中的内源香气成分的分离和鉴定方法。本发明提供了对中国石竹、香石竹、须苞石竹和瞿麦等石竹属花卉内源香气成分的分离和鉴定方法。本发明包括利用有机溶剂MTBE萃取方法分离和收集石竹属花卉中内源香气物质，利用气相色谱质谱联用检测分析石竹属花卉外源挥发香气物质，并对香气成分进行定性和定量分析等步骤。在对检出的内源香气成分的定性分析中，未知化合物经过在检索后与NIST MS Search2.3谱库相匹配，以参数SI>800，RSI>800的成分作为定性。已定性组分的含量按内标法计算。本发明的分离和鉴定方法具有操作简便、快速和适用性广等优点。

技术领域

本发明属于植物成分分析检测技术领域，具体涉及一种石竹属花卉中的内源香气成分的分离和鉴定方法。

背景技术

石竹属下有约600种花卉，常见的品种包括中国石竹、瞿麦、香石竹(康乃馨)和须苞石竹等都是石竹属下被广泛种植观赏的种类。种植栽培石竹属花卉不仅可以供人们观赏，还可以提取香精、提取制作化妆品所需材料，故对石竹属花卉中香气成分的分析将具有巨大的应用、经济价值。

目前国内乃至世界范围内对于整个石竹属花卉花香物质的分析方法尚未存有完整体系，仅有国外对部分石竹科下其他属中花卉的香气物质分离提取方法有过报道，故建立完整石竹属花卉的香气物质分析体系将具有重大理论以及实践意义。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，针对石竹属花卉香气物质分离测定方法的空缺，本发明在国内外首次提供了一种对石竹属花卉中的香气成分进行分离和鉴定的方法，以填补石竹属花卉香气物质成分分析的空白。

本发明的技术方案如下所述：

本发明提供了一种对石竹属花卉中的香气成分的分离和鉴定方法，包括以下步骤：

(1)利用有机溶剂MTBE萃取方法分离和收集石竹属花卉中内源香气物质，具体为：取新鲜、在液氮中研磨至粉状花瓣样品0.10g于离心管中，加入500μL超纯水，振荡混匀；向离心管中加入500μL MTBE(含有5×10-3μg异丁苯作为内标)，振荡混匀后，加入0.2-0.3g无水硫酸钠去除水分，并于涡旋仪振动混匀2min；在室温下，以12000rmp离心2min；以一次性注射器取上层有机相，过有机滤膜后收集于进样瓶，待测；

(2)利用液体样品进样的气相色谱质谱联用检测分析上述所得石竹属花卉内源香气物质，并对其中的香气成分进行定性定量分析；

a)气相色谱条件：采用DB-5MS石英毛细柱，所述的的DB-5MS石英毛细柱参数为30m×0.250mm×0.25μm，载体气为氦气，流量为1.0mL/min，采用不分流模式进样，进样口温度为250℃，升温程序为：初始温度为35℃，保持4min，以5℃/min升至250℃，保持15min；

b)质谱条件：电子轰击离子源，电子能量为70eV，离子源温度为280℃，离子传输线温度为260℃，采用全扫描模式，扫描范围m/z：30-350；

(3)在气相色谱质谱联用检出的香气成分进行定性分析过程中，未知化合物经检索同时与NIST MS Search2.3谱库相匹配，以参数RSI>800，SI>800的成分作为定性的参数；

(4)在一个定量过程中，化合物含量按内标法进行计算；即以各种化合物的峰面积除以内标物质异丁苯的峰面积乘以内标物质的含量(μg)除以样品质量(g)；

其中：所述的有机溶剂MTBE即甲基叔丁基醚，由SIGMA ALDRICH公司购得

所述的分析检测仪器为适用于液体样品进样的气相色谱质谱联用仪。

所述的定量方法为内标法定量。

本发明的积极效果：