[发明专利]一种浓度梯度校准芯片的制备方法及其校准方法

说明书

本发明公开了一种浓度梯度校准芯片的制备方法，包括如下步骤：取含有反应池的微流体芯片；用荧光纳米材料配制形成混合液，并将该混合液按比例稀释成不同的梯度浓度；将不同梯度浓度的混合液分别点制在各个反应池内；经点制完成的微流体芯片表面上覆膜形成校准芯片；还公开了浓度梯度校准芯片的校准方法，包括：采集一组标准数据和一组待测数据；将标准数据与待测数据作线性拟合，计算两组数据的线性相关系数Rsupgt;2/supgt;和斜率K值，并判断是否满足线性相关系数Rsupgt;2/supgt;＞0.95，0.95＜斜率K值＜1.05，以最终完成校准，以达到对仪器荧光信号范围校准且校准准确性较高的目的，同时能够提高校准芯片的制备成品率，降低制备成本。

技术领域

本发明属于微流控生物芯片校准的技术领域，具体而言，涉及一种浓度梯度校准芯片的制备方法及其校准方法。

背景技术

随着基因扩增反应与分析技术在检测方面的不断成熟，结合微流控生物芯片技术、恒温扩增反应与分析技术和共聚焦扫描检测技术方面研究成果的恒温扩增核酸分析仪在临床诊断中逐渐普及，该仪器实现了细菌感染病原学的快速诊断，解决传统细菌培养检测法存在的缺陷，对于疾病的诊断、防控有着重要意义。作为一款集成光源、光路及信号采集系的精密仪器，对检测的灵敏度要求极高。使用时间延长产生的光源衰减，运输期间的光路漂移，使用过程中的PMT抖动等微小变化，都可能对结果的判读产生影响，因此采用合适的方法对恒温扩增核酸分析仪进行校准是非常必要的。

目前，校准方法主要是采用荧光纳米材料制作的校准芯片或者有机荧光染料制作的校准芯片进行校准。校准芯片的制备采用单一浓度荧光材料，只能对仪器进行单一荧光信号校准，不能对仪器的荧光信号范围进行校准。目前的校准芯片的制备，由于采用单一浓度荧光材料，要求信号点间有很好的一致性，制备难度高，成品率低，导致制备成本高。

因此，亟待开发一款可对仪器荧光信号范围进行校准、制备成本低且成品率高的校准芯片，需保证基于该校准芯片的校验过程操作简单，提升其市场推广能力。

发明内容

鉴于此，为了解决现有技术存在的上述问题，本发明的目的在于提供一种浓度梯度校准芯片能够实现对仪器荧光信号范围进行校准，同时达到提高校准芯片的制备成品率，降低校准芯片的制备成本；还提供一种浓度梯度校准芯片的校准方法以达到简化校准操作步骤，实现对仪器荧光信号范围进行校准的目的。

本发明所采用的技术方案为：一种浓度梯度校准芯片的制备方法，该制备方法包括如下步骤：

(1)取微流体芯片，该微流体芯片设有n个反应池，且n≥3；

(2)用荧光纳米材料配制形成混合液，并将该混合液按比例稀释成m个不同的梯度浓度，且m≥3；

(3)将不同梯度浓度的混合液分别点制在各个反应池内；

(4)经点制完成的微流体芯片表面上进行覆膜，以形成校准芯片。

进一步地，将n个反应池分成多个组，各组依次排布于微流体芯片上且各组均包括i个反应池，且i＝m。

进一步地，各所述反应池沿同一圆周方向均匀分布于所述微流体芯片的表面上。

进一步地，所述微流体芯片通过塑料材质加工而成，塑料材质包括PVC、PC、PP等。

进一步地，所述校准芯片的荧光信号值范围在0～65535之间。

一种浓度梯度校准芯片的校准方法，该校准方法包括如下步骤：

(a)将校准芯片置于标准分析仪器上进行扫描，并采集一组标准数据；

(b)将步骤(a)中的校准芯片置于待校分析仪器上进行扫描，并采集一组待测数据；