[发明专利]检测转基因水稻科丰6号的DNA标准品及其应用

说明书

本发明提供了一种检测转基因成分的DNA标准品，所述DNA标准品包括科丰6号转化体特异性序列Kefeng6的基因片段、水稻内源基因SPS的基因片段和水稻内源基因PLD的基因片段，所述Kefeng6的基因片段的序列如SEQ ID No.1第1‑155位所示，所述SPS的基因片段的序列如SEQ ID No.1第178‑258位所示，所述PLD的基因片段的序列如SEQ ID No.1第259‑326位所示。本发明所提供的标准质粒分子质量好，纯度符合要求，能够满足大批量制备，均匀性好，稳定性强，可以检测出靶标片段，为水稻的转基因成分鉴定工作提供了通用的阳性对照样品以及参考。

技术领域

本发明涉及转基因技术领域，尤其涉及一种检测转基因水稻品系科丰6号的DNA标准品及其应用。

背景技术

转基因产品检测标准样品是具有一种或多种足够均匀和很好确定的特性值，在转基因产品检测中用以校准测量装置、评价测量方法或给材料赋值的一种材料或物质。标准样品在保证测试结果的可比性和溯源性、保障食品安全、解决贸易争端、促进经济发展等方面均具有重要的意义。

转基因水稻，是指通过转基因技术将不同品种水稻或近缘物种的抗虫基因、抗病基因等导入某种水稻基因组内培育出的水稻品种。科丰6号是中国自主研发的双价抗虫转基因水稻，其抗虫基因为苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)杀虫晶体蛋白Cry1Ac基因和豇豆胰蛋白酶抑制剂基因SCK基因，目前已通过生产性试验，正在申请生产应用安全证书，具有良好的商业化前景。

目前尚未有针对Cry1Ac/SCK双价抗虫转基因水稻科丰6号进行检测的质粒DNA标准品的相关报道。

发明内容

为了解决上述问题，一方面，本发明提供了一种检测转基因成分的DNA标准品，所述DNA标准品包括科丰6号转化体特异性序列Kefeng6的基因片段、水稻内源基因SPS的基因片段和水稻内源基因PLD的基因片段。

其中，所述Kefeng6的基因片段的序列如SEQ ID No.1第1-155位所示，所述SPS的基因片段的序列如SEQ ID No.1第178-258位所示，所述PLD的基因片段的序列如SEQ IDNo.1第259-326位所示。

进一步地，所述DNA标准品包括依次连接的Kefeng6的基因片段、SPS的基因片段和PLD的基因片段；优选的，所述DNA标准品还包括用于连接Kefeng6的基因片段、SPS的基因片段和PLD的基因片段的间隔序列。

更进一步地，所述DNA标准品包含SEQ ID No.1所示的序列。

另一方面，本发明还提供了包含上述DNA标准品的重组载体；优选的，所述骨架载体选自pUC18、pUC19、pUC57中的一种或多种，更优选，pUC57，更优选，将所述DNA标准品连接于pUC57平端酶EcoRV的酶切位点处。

另一方面，本发明还提供了上述DNA标准品或权利要求4所述的重组载体在检测转基因成分中的应用；优选的，所述转基因成分来源于转基因植物和/或其加工品；更优选的，所述转基因植物为转基因水稻；更优选的，所述转基因水稻为转基因水稻科丰6号。

另一方面，本发明还提供了一种检测转基因成分的PCR试剂盒，所述试剂盒包括上述DNA标准品或重组载体。

进一步地，所述试剂盒还包括引物对，所述引物对包括SEQ ID No.2和SEQ IDNo.3所示的引物对、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的引物对、SEQ ID No.8和SEQ IDNo.9所示的引物对。

进一步地，所述试剂盒还包括探针，所述探针包含SEQ ID No.4所示的探针、SEQID No.7所示的探针和SEQ ID No.10所示的探针。