[发明专利]一种超高灵敏的检测人血浆中奋乃静浓度的方法在审
| 申请号： | 201910509419.2 | 申请日： | 2019-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN110243962A | 公开（公告）日： | 2019-09-17 |
| 发明（设计）人： | 杨勇;陈涛;刘旭凌;钟勘;姜金方;陈醒;左正龙;张先锋;胡凤梅;陈云辉;陈笑艳;钟大放 | 申请（专利权）人： | 苏州海科医药技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06 |
| 代理公司： | 苏州唯亚智冠知识产权代理有限公司 32289 | 代理人： | 张翠茹 |
| 地址： | 215000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 超高灵敏 灵敏度 人血浆 检测 检测技术 色谱分离 血浆样品 质谱检测 前处理 | ||
1.一种超高灵敏的检测人血浆中奋乃静浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤1：血浆样品前处理，在1.5mL离心管中加入血浆样品，内标溶液，加入甲醇，涡流振荡，离心，取出上清转移至96孔板中，使用氮气吹干浓缩，加复溶剂复溶，涡流振荡，进行LC-MS/MS分析；
步骤2：色谱分离；
色谱条件，色谱柱：Triart-C18，3.0μm，2.0*100mm；进样量：20μL；柱温：40℃；流动相A相选用1mM甲酸铵水溶液含0.5％，流动相B项为含0.1％甲酸乙腈，在梯度洗脱条件下，梯度洗脱：0-0.50min，30％B相；2.50min，60％B相；2.51min～3.50min，30％B相，自动进样器温度为15℃，流动相的流速为：0.5mL/min；
步骤3：质谱检测；
质谱条件：电喷雾电离源；电压为5500V；离子源温度为550℃；Curtain Gas和CID压力分别为30和8psi；扫描模式为+MRM；监测离子反应分别为：奋乃静，m/z 404.2→m/z 171.2；奋乃静-d4，m/z 408.2→m/z 171.2；CE分别为32和31.5eV；DP分别为100V和81V；扫描时间为150ms。
2.根据权利要求1所述的一种超高灵敏的检测人血浆中奋乃静浓度的方法，其特征在于：步骤1血浆样品前处理，取100μL血浆样品，分别加入25.0μL内标工作液、300μL甲醇，涡流2min，以14000rpm转速离心5min，取出上清300μL转移至96孔板中，N2吹干，加120μL复溶剂乙腈-水复溶，涡流振荡5min，取20.00μL进行LC-MS/MS分析。
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