[发明专利]一种制备黄芪甲苷的方法

说明书

本申请提供一种制备黄芪甲苷的方法，属于微量成分的提纯技术领域。制备黄芪甲苷的方法，包括如下步骤：将含有黄芪醇提物的黄芪溶液置于高效液相色谱的色谱柱内，进行洗脱。当黄芪甲苷出峰时，收集黄芪甲苷的馏分。通过此方法能够得到纯度高的黄芪甲苷，该方法周期短，操作简单。

技术领域

本申请涉及黄芪甲苷分离技术领域，具体而言，涉及一种制备黄芪甲苷的方法。

背景技术

黄芪是属于豆科黄芪属植物，其分类有蒙古黄芪和膜荚黄芪，主要在黑龙江、吉林、内蒙古等省区分布，被称为药中之上品。黄茂微温，性甘，脾经，归肺，有利于利尿托毒、补气固表、排脓、敛疮生肌。黄芪的主要包含有黄酮类物质、皂苷类、多糖类及有机酸，黄芪多糖和皂苷类是黄芪中的主要活性物质，黄芪皂苷(Ⅰ-Ⅷ)是黄芪中主要皂苷类物质。2015版《中国药典》规定，黄芪中黄芪甲苷的含量是药材质量控制的重要指标。黄芪甲苷是黄芪三萜皂苷中的黄芪皂苷Ⅳ，黄芪中含量黄芪甲苷极低，一般在0.1％左右，黄芪药材中成分较多，分离、提取非常困难。

黄芪中含有黄芪多糖、皂苷类(黄芪皂苷Ⅰ-Ⅷ)、黄酮类(山奈酚、鼠李柠檬素、棚皮素、黄酮苷等)、氨基酸类(天冬氨酸、刀豆氨酸、丙氨酸、脯氨酸、r-氨基丁酸、精氨酸等)及其他微量元素(铁、锰、锌等)。黄芪皂苷是主要的天然活性物质。药理实验表明，黄芪皂苷具有抗炎症、镇静、抗菌、降压、镇痛、抗氧化、治疗心脑血管相关疾病、糖尿病及慢性肾炎等生理活性以及药理作用，并且无毒副作用，其中的黄芪甲苷有利于心脏正性肌力作用，也是降压重要有效成分之一。

黄芪甲苷的提取方法一般以水提法得到黄芪提取液，然后再通过正丁醇萃取法、大孔法吸附树脂纯化分离皂苷单体，但该方法周期长、操作复杂，生产成本较高。

发明内容

本申请的目的在于提供一种制备黄芪甲苷的方法，得到的黄芪甲苷的纯度高，该方法周期短，操作简单。

第一方面，本申请实施例提供一种制备黄芪甲苷的方法，包括如下步骤：将含有黄芪醇提物的黄芪溶液置于高效液相色谱的色谱柱内，进行洗脱。当黄芪甲苷出峰时，收集黄芪甲苷的馏分。

使用高效液相色谱，能够有效将黄芪溶液中的各组分在色谱柱中分离，在洗脱的过程中，当黄芪甲苷出峰时，说明高效液相中产生的馏分是黄芪甲苷，开始收集黄芪甲苷的馏分。使得到的黄芪甲苷的纯度更高，容易操作。可选地，当黄芪甲苷出峰结束以后，停止收集黄芪甲苷的馏分，使黄芪甲苷的馏分收集完全，得到高纯度、高得率的黄芪甲苷。

结合第一方面，在另一实施例中，黄芪溶液中的溶剂为甲醇。使用甲醇作为黄芪溶液中的溶剂，可以有效减少高效液相色谱洗脱时出现杂峰，使得到的黄芪甲苷的纯度更高。

结合第一方面，在另一实施例中，洗脱的条件是：色谱柱为C18反向色谱柱，色谱柱的柱温为24-26℃，流动相为乙腈和水，流动相的流速为8-12mL/min，梯度洗脱的洗脱液为乙腈和水，检测波长为180-220nm。能够得到黄芪甲苷峰，且对黄芪甲苷的分离效果更好，得到的黄芪甲苷的纯度更高。

结合第一方面，在另一实施例中，黄芪溶液置于色谱柱之前，还包括使用孔径为0.22-0.25微米的微孔滤膜进行过滤的步骤。将黄芪溶液中的大分子物质、多糖等过滤掉，使黄芪溶液中剩余的大部分成分为皂苷组分，以便对黄芪甲苷进行精确分离，使黄芪甲苷的得率更高。

结合第一方面，在另一实施例中，收集黄芪甲苷的馏分以后，还包括使用氮吹仪吹干，并真空干燥的步骤。以便收集到纯度高的干燥的黄芪甲苷。

结合第一方面，在另一实施例中，黄芪醇提物的制备方法，包括：将黄芪与乙醇溶液混合，在温度为60-85℃的条件下进行提取，固液分离得到黄芪醇提物。

通过对黄芪进行醇提，能够使黄芪中的黄芪甲苷尽可能充分提取出来，以便黄芪甲苷的制备，使黄芪甲苷的得率更高。