[发明专利]牦牛亲子鉴定和个体识别检测试剂盒在审
申请号: | 201910509984.9 | 申请日: | 2019-06-13 |
公开(公告)号: | CN111876489A | 公开(公告)日: | 2020-11-03 |
发明(设计)人: | 裴杰;郭宪;包鹏甲;褚敏;熊琳;梁春年;丁学智;吴晓云;阎萍 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 |
主分类号: | C12Q1/6888 | 分类号: | C12Q1/6888;C12N15/11 |
代理公司: | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人: | 张秋云 |
地址: | 730050 甘肃*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 牦牛 亲子鉴定 个体 识别 检测 试剂盒 | ||
1.牦牛亲子鉴定和个体识别检测试剂盒,其特征在于,所述检测试剂盒包括15个SSR位点,所述15个SSR位点分别为BM2113、CSSM036、D25GT、D28AC、DXTG、HEL6、ILSTS028、INRA023、INRA037、INRA063、SPS115、TGLA126、YAK08、YAK11和YAK20。
2.根据权利要求1所述的牦牛亲子鉴定和个体识别检测试剂盒,其特征在于,复合PCR扩增系统得到所述15个SSR位点的基因分型,所述复合PCR扩增系统将15个SSR位点分为第一组SSR位点和第二组SSR位点,分别进行PCR扩增,其组合方式与相应的PCR扩增引物如下:
第一组的8个位点分别为采用FAM荧光素进行标记的BM2113、D25GT、DXTG、YAK11和采用HEX荧光素进行标记的HEL6、INRA023、TGLA126、YAK20,相应的PCR扩增引物核苷酸序列依次为S:CTTCCTGAGAGAAGCAACACC和U:GCTGCCTTCTACCAAATACCC、S:CACCAATAAAAGTAAAAACACCG和U:AAGATCCCTTGGAGGAGGAA、S:GTCATCGTGGGGGTTCTTATAG和U:ATTGCCTCACCAGCAAAAAT、S:TCCCCTCACTCCTCATTGGT和U:TGCAGGCAGTTTCTTACCAGT、S:GGACACGACTGAGCAAGTAACA和U:GCTTTGGCAGGCAGATACAT、S:ATTTCCCTTCTGACTGGTACTTC和U:GTGTCCCTCCTCTAATCCCTAA、S:AGCACAAAGTAAACCTGCAATAA和U:CTTCACCATTGGACCACGAG以及S:AAGCATTCTTTGGACACTCAAGT和U:AACAGGATCGTCAACAAATTATG;
第二组的7个位点分别为采用TAMRA荧光素进行标记的D28AC、INRA037、INRA063、SPS115和采用ROX荧光素进行标记的CSSM036、ILSTS028、YAK08,相应的PCR扩增引物核苷酸序列依次为S:CCAAGCATACATCTGCTCCA和U:GAATCCACACCCCTCCACTG、S:TTTGATGCTGGCATAGTGGCTAAA和U:AAGCTACCCAGCAGGTGAA、S:AAACCACAGAAATGCTTGGAAG和U:ATTTGCACAAGCTAAATCTAACAA、S:AAAGTGACACAACAGCTTCACC和U:ACCGAGTGTCCTAGTTTGGC、S:GATGACTCAACCGCACGTCT和U:AAGAAGTACTGGTTGCCAATCG、S:AGAAGAGTGTACCTCCTCCCA和U:GCATGCCAGATATCCATTGCG以及S:ACTGGAGTAGGTTGCCCTGC和U:ATTCTCCTGAGCCTGGCTTG。
3.根据权利要求2所述的牦牛亲子鉴定和个体识别检测试剂盒,其特征在于:所述第一组SSR位点BM2113、D25GT、DXTG、YAK11、HEL6、INRA023、TGLA126和YAK20的PCR扩增引物组成第一组引物混合液,其各自的浓度依次为3.0μmol/L、5.0μmol/L、13.5μmol/L、3.0μmol/L、3.0μmol/L、2.0μmol/L、3.0μmol/L和4.0μmol/L;
所述第二组SSR位点D28AC、INRA037、INRA063、SPS115、CSSM036、ILSTS028和YAK08的PCR扩增引物组成第二组引物混合液,其各自的浓度依次为17.5μmol/L、18.8μmol/L、27.5μmol/L、13.8μmol/L、36.2μmol/L、17.5μmol/L和13.8μmol/L。
4.根据权利要求2所述的牦牛亲子鉴定和个体识别检测试剂盒,其特征在于:所述复合PCR扩增系统检测牦牛基因组DNA样本,所述牦牛基因组DNA样本提取自牦牛血液、组织样品或精液样品中的一种或多种。
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