[发明专利]一种青钱柳多糖的提取及脱色方法

说明书

本发明属于功能性食品领域，具体公开了一种青钱柳多糖的提取及脱色方法，包括如下步骤：将青钱柳叶原料粉碎，低功率超声辅助复合酶酶解三级逆流提取，提取液去杂、浓缩、加乙醇沉淀多糖；得到的多糖沉淀加蒸馏水溶解，然后用大孔树脂超声辅助脱色，脱色液浓缩，冷冻干燥即可得脱色青钱柳多糖干燥粉。本发明用超声辅酶解三级逆流提取，多糖得率较高，提取温度较低，能较好保存多糖的生物学活性，制备的多糖粉呈浅黄色，物理性状好，可作为功能性食品添加剂使用，为原料可灌装胶囊、压片或生产口服液等功能性食品。

技术领域

本发明属功能性食品生产技术领域，具体涉及一种青钱柳多糖的提取及脱色方法。

技术背景

青钱柳(Cyclocarya Paliurus)分类上属于双子叶植物胡桃科，又名青钱李、甜茶树、摇钱树、一串钱等，仅存于中国，零散分布在我国南方，混生于海拔500～2500m山地湿润的常绿林中，是冰川世纪时期幸存下来的珍稀树种，属国家二级保护植物。青钱柳枝叶味甘甜，具有清热消肿、止痛的功效，人们将其芽叶炮制成茶品，俗称“甜茶”，对已成为人类第二大杀手的高血糖病有着显著的疗效，继被人们誉为医学界的第一棵树—柳树与第二棵树—红豆杉之后称为医学界的第三棵树，同时被誉为植物界的大熊猫。据《中国中药资源志要》记载，青钱柳树皮、叶具有清热消肿、止痛功能。现代医学研究成果表明，青钱柳具有明显的降血糖、降血压、降血脂及增强免疫力、抗衰老等多种功效，是很好的天然保健食品资源，被医学界称为“天然胰岛素”。青钱柳中有多种生物活性物质，多糖是其主要有效成分之一，现代研究发现青钱柳多糖有多种生物活性。

青钱柳多糖能显著促进小鼠骨髓来源的树突状细胞表面MHCⅡ表达，且在一定范围呈现浓度依赖，说明青钱柳多糖可促进树突状细胞的成熟，增强机体免疫功能。研究发现，青钱柳多糖对人宫颈癌HeLa细胞生长有显著抑制作用，而对人脐带内皮细胞的生长抑制率较低。在一定浓度下对人胃癌MGC-803细胞生长抑制率可达65.07％，细胞凋亡率达25.44％，说明青钱柳多糖有抑制癌细胞的作用，且具有毒性小的特点。青钱柳多糖对DPPH自由基的清除率较高，浓度为0.4mg/mL时对DPPH自由基的清除率可达71.8％，浓度为1.2mg/mL时对羟基自由基的清除率可达68.1％。在β-胡萝卜素-亚麻油酸实验中，青钱柳多糖表现出对β-胡萝卜素的保护作用。研究发现青钱柳多糖能显著降低高脂小鼠肝脏MDA、游离脂肪酸的含量，提高肝脏SOD、GSH-Px的活性，可减轻小鼠肝组织自发性及四氯化碳、过氧化氢、亚铁离子-维生素C所诱导的小鼠肝脏脂质过氧化的程度，且呈一定的浓度依赖。上述研究表明，青钱柳多糖有增强机体免疫功能和抗氧化作用。

青钱柳多糖可降低由四氧嘧啶造成的永久性高血糖小鼠的血糖值，并且可以同时降低胰岛素、胰高血糖素和C肽的含量，对小鼠体重的减轻有明显的抑制作用。通过对四氧嘧啶造成糖尿病模型小鼠的胰腺组织进行结构观察，发现给予青钱柳多糖的小鼠胰岛损伤程度轻，所以青钱柳降血糖的作用机制可能是改善胰岛细胞结构、保护胰岛细胞。实验发现，青钱柳多糖对α-D-葡萄糖苷酶活性具有显著的抑制作用，可显著提高小鼠对葡萄糖、淀粉的糖耐量，对蔗糖影响不显著。通过体外实验证明青钱柳多糖可以抑制脂肪酶活性，降低脂变细胞内脂滴和三酰甘油的量。在体内实验中，青钱柳多糖可降低高血脂小鼠模型的总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇，而提高高密度脂蛋白胆固醇的量，增强超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性，降低高脂血症小鼠肝脏受损的程度。青钱柳多糖在保护心肌细胞方面，可显著减少心肌缺血再灌注损伤大鼠血清中肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)两种酶的活性和MDA的含量并提高SOD的活性。保护心肌作用是通过抗氧化、清除自由基、减少脂质过氧化的生成实现的。

青钱柳多糖存在于细胞壁内(又称胞内多糖)。提取就是多糖从细胞中溶出过程，目前关于青钱柳多糖提取工艺的文献报道较少，虽有热水提取、微波提取、超声提取工艺的探索，但总的来说提取效率不高，还处于实验室研究阶段，不能应用于生产，青钱柳多糖提取需要探索先进生产工艺。纯化工艺是指从多糖样品中除去杂质的过程。这些杂质包括单糖、寡糖、蛋白质、色素、无机盐等，其中色素对多糖品质影响较大。目前，青钱柳多糖脱色研究较少，现有的脱色工艺多糖损失率较高、脱色效果不好，多糖脱色需要探寻新的方法。