[发明专利]头孢硫脒中杂质溴乙酸的检测方法

说明书

本申请涉及头孢硫脒中杂质溴乙酸的检测方法。所述检测方法采用高效液相色谱‑质谱法，其中，高效液相色谱的条件为：流动相A：水；流动相B：乙腈；其中，采用流动相A与流动相B进行梯度洗脱。本申请的方法中头孢硫脒中溴乙酸检测限低，灵敏度高，能高效地对头孢硫脒中的溴乙酸进行ng/ml级检测和控制，对头孢硫脒的质量控制、药用安全性有重要意义。

技术领域

本发明涉及溴乙酸的检测方法，具体地，本发明涉及利用高效液相色谱-质谱检测头孢硫脒中杂质溴乙酸的方法。

背景技术

药物中存在的杂质很有可能是对人体有毒性的物质，因而在药物生产过程中以及保质期内，对于药物中杂质的监测和控制是提高药物质量的重要环节。各种杂质中，基因毒性杂质是指能直接或间接损伤细胞DNA，产生致突变和致癌作用的物质。在药物活性物质的合成中不存在基因毒性反应物，但在药物活性物质中存在含基因毒性结构的物质，被称为潜在基因毒性杂质。

在药物生产过程中，可能产生基因毒性杂质的环节包括新药合成、原料纯化、储存运输(与包装物接触)等，故在新药合成阶段应该指明涉及到的所有具有基因毒性或有致癌性的化学物质，如所用试剂、中间体、副产品等。更进一步，在药物活性物质中没有出现的基因毒性反应物和有基因毒性结构的物质，都应该被考虑。具有毒性作用的基团一般具有亲电试剂的性质，这些基团在生理条件下同体内核酸、蛋白质或其他重要成分中的亲核中心发生取代反应，使这些成分发生不可逆的损伤，表现为毒性、致突变或致癌等作用。

头孢硫脒是我国研制的第一代头孢菌素，对革兰阳性菌有较强的抗菌活性，对少数肠杆菌亦有良好的抗菌活性，对草绿色链球菌、溶血性链球菌、非溶血性链球菌、白喉杆菌、产气荚膜杆菌、破伤风杆菌和炭疽杆菌有良好的抗菌活性。

现有工业制备头孢硫脒时，因溴的活泼性较强，都采用溴乙酰溴作为酰基供体，用溴乙酰溴与7-ACA(7-氨基头孢烷酸)反应生成中间体溴乙酰7-ACA，再与硫脲反应生成头孢硫脒，该工艺使生成头孢硫脒的反应较易进行，反应时间较短，操作较简易。当以溴乙酰溴为反应物时，其未反应完全的溴乙酰溴无法在后处理的条件(碱性、水溶液)下稳定存在，会转化为溴乙酸则会引起溴乙酸在头孢硫脒中残留风险。根据Derec和Sarah软件评估，溴乙酸为基因毒性杂质，需要对其进行监测和控制。因此，需要对头孢硫脒中残留的溴乙酸进行定性和定量检测。对头孢硫脒中的溴乙酸的定性和定量检测更未见有报道。

溴乙酸限度的制定：注射用头孢硫脒，规格为1.0g，临床用法用量为：一次2g，一日2～4次；则最大日剂量8g，根据ICH M7指导原则和用药间隔期的折算，假设1年每天用药，杂质按照1～12个月的限度控制，限度计算如下：

由于溴乙酸杂质限度较低，因此，急需一种检测灵敏度高、专属性强，能够对头孢硫脒中杂质溴乙酸进行定性和定量检测的方法。

发明内容

有鉴于此，本发明的主要目的在于提供一种对头孢硫脒中杂质溴乙酸进行定性和定量检测的方法。

为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

本发明提供了一种头孢硫脒中杂质溴乙酸的检测方法，其中，所述方法采用高效液相色谱-质谱法，其中，高效液相色谱的条件为：

流动相A：水；

流动相B：乙腈；

其中，采用流动相A与流动相B进行梯度洗脱，所述洗脱的梯度和流速为：

进一步地，所述洗脱的梯度和流速为：