[发明专利]一种油菜短肽BnPEP5的应用

说明书

本发明提供一个油菜（Brassica napus）短肽BnPEP5激发十字花科植物产生对核盘菌（Sclerotinia sclerotiorum）抗性和应用。本发明应用的油菜短肽BnPEP5由27个氨基酸组成，是全长蛋白的C端部分。本发明首次通过人工合成短肽BnPEP5，阐明了该短肽对核盘菌抗性的激发作用，并提供该短肽通过浸润和喷雾处理十字花科植物油菜和芥菜（Brassica juncea）激发其产生对核盘菌抗性、从而防控油菜和芥菜菌核病的应用。本发明提供的BnPEP5短肽是植物自身合成的产物，利用BnPEP5短肽激发免疫从而防治菌核病具有天然绿色、不污染环境、对人畜无害、不会诱导病原物产生抗药性等优点。此外，BnPEP5短肽易于人工合成，获取简便，抗病激发作用强烈，所需浓度低，是一种新型生态和环境友好型作物病害防控制剂。

技术领域

本发明属生物技术领域，涉及一种油菜短肽BnPEP5的免疫激发功能及其在菌核病防控中的应用。

背景技术

1、植物免疫激发技术

植物免疫是植物通过受体识别病原物分子从而激活的防卫反应。植物免疫系统有多个层次，其中第一层次为植物细胞表面的跨膜分子模式识别受体(patternrecognitionreceptors，PRRs)识别源自病原物及植物自身的保守的分子模式产生的免疫，称为模式触发性免疫(pattern-triggered immunity，PTI)。通俗地说，植物能感知病原物侵染等引起的对植物细胞完整性的破坏，并产生伤害相关分子模式(damage-associatedmolecularpatterns,DAMPs)，这些DAMPs通过PRR受体识别激发植物产生PTI免疫反应，包括活性氧迸发、激酶级联的活化、防卫相关基因的表达等，最后表现对病原物的抗性。PTI在防止非适应性微生物侵染植物的非寄主抗性(nonhost resistance)和限制适应性病原物侵染感病寄主植物的基础抗性(basal resistance)中起重要作用。DAMP激发的PTI免疫具有广谱、强烈、稳定等优点。此外，由于DAMP是植物自身的天然产物，因此利用DAMP激发免疫从而达到防治病害的目的是一种环境生态友好型绿色病害防控新方法。

2、菌核病防控技术

菌核病由核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)侵染所致。核盘菌是坏死营养型(necrotroph)病原真菌，寄主防卫极广，是油料作物以及蔬菜作物的主要病害。每年造成巨大经济损失。由于缺乏高抗品种，化学防治仍然是重要手段。由于一些农药存在生态污染、人畜毒害、以及易使病原物产生抗药性等问题，新型绿色防治制剂亟待研发。

发明内容

本发明的目的是提供一种油菜(Brassica napus)短肽BnPEP5激发十字花科植物产生对核盘菌(Sclerotinia sclerotiorum)抗性的应用。本发明应用的油菜短肽BnPEP5序列如SEQ ID NO：1所示，共由27个氨基酸组成，是全长蛋白(序列如SEQ ID NO：2所示)的C端部分。在本发明之前，短肽BnPEP5的功能没有任何公开报告。本发明首次通过人工合成短肽BnPEP5，阐明了该短肽对核盘菌抗性的激发作用，并提供该短肽通过处理十字花科植物激发其产生对核盘菌抗性、从而防控菌核病的应用。通过以下步骤实现：

(1)BnPEP5短肽的人工合成或生物表达获取

可以委托专业多肽合成公司合成。也可通过生物表达获取短肽BnPEP5：将BnPEP5相应核苷酸序列克隆入表达载体、转化至真核或原核微生物、微生物扩繁、提取和纯化目的短肽。

(2)BnPEP5短肽的植物处理