[发明专利]高比活力的蛴螬酶解初级分离物及其制备方法有效
| 申请号： | 201910519563.4 | 申请日： | 2019-06-17 |
| 公开（公告）号： | CN110343733B | 公开（公告）日： | 2021-03-26 |
| 发明（设计）人： | 石冬冬;李秀梅;杨培龙;张海英;闻治国;满晨 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院饲料研究所 |
| 主分类号： | C12P21/06 | 分类号： | C12P21/06;C07K1/16;C07K1/20;A61P39/06 |
| 代理公司： | 北京法信智言知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11737 | 代理人： | 刘静荣 |
| 地址： | 100081 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 活力 蛴螬 初级 分离 及其 制备 方法 | ||
1.高比活力的蛴螬酶解初级分离物，其特征在于，所述初级分离物由包括以下步骤的方法制备：
采用葡聚糖凝胶柱G-15，以超纯水为流动相，在流速为14 -16 mL/min、柱温27 - 33℃、波长为215- 225 nm的条件下对蛴螬酶解液进行分离，梯度洗脱程序为16 min，用超纯水配制浓度为10 mg/mL的蛴螬酶解液溶液，上样量为2 mL，根据蛴螬提取物在制备色谱中的分离时间，每2 min收集一管，收集2 – 4min的馏分，得到初级分离物，
所述蛴螬酶解液由包括以下步骤的方法制备得到：
（a）将蛴螬加入pH 6.8～7.2的缓冲体系中，高速匀浆，得到虫浆液，使蛴螬的浓度为5%；
（b）向虫浆液中加入脂肪酶，脂肪酶与蛴螬的比例为0.6%，在38～42℃条件下酶解3小时；
（c） 将步骤（b）得到的液体灭活，静止分层后，离心，取上清液，得到蛴螬酶解液。
2.高比活力的蛴螬酶解初级分离物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
采用葡聚糖凝胶柱G-15，以超纯水为流动相，在流速为14 -16 mL/min、柱温27 - 33℃、波长为215- 225 nm的条件下对蛴螬酶解液进行分离，梯度洗脱程序为16 min，用超纯水配制浓度为10 mg/mL的蛴螬酶解液溶液，上样量为2 mL，根据蛴螬提取物在制备色谱中的分离时间，每2 min收集一管，收集2 – 4min的馏分，得到初级分离物，
所述蛴螬酶解液由包括以下步骤的方法制备得到：
（a）将蛴螬加入pH 6.8～7.2的缓冲体系中，高速匀浆，得到虫浆液，使蛴螬的浓度为5%；
（b）向虫浆液中加入脂肪酶，脂肪酶与蛴螬的比例为0.6%，在38～42℃条件下酶解3小时；
（c） 将步骤（b）得到的液体灭活，静止分层后，离心，取上清液，得到蛴螬酶解液。
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