[发明专利]黑苦荞茎叶提取物治疗2型糖尿病的方法与系统

说明书

本研究不同于以往的其它研究，应用生物学方法探讨黑苦荞茎叶提取物对2型糖尿病治疗的作用机制。以骨骼肌细胞作为实验对象，构建阻断P13/Akt信号通路的实验组，再给予黑苦荞茎叶提取物，分析肝细胞相关糖类基因表达，探讨黑苦荞茎叶提取物对2型糖尿病治疗的细胞机制。目前，本项研究国内外尚未见报道。所以黑苦荞茎叶提取物提供了一个新颖的治疗方法。用此方法可节省许多购买db/db小鼠和双基因敲除小鼠的经费问题。本研究通过测定胰岛素受体底物P‑IRS‑1的蛋白表达水平，再则探测黑苦荞茎叶提取物对小鼠成肌细胞株(C2C12)胰岛素敏感性的影响，为2型糖尿病的治疗提供理论依据。

技术领域

黑苦荞茎叶提取物对肥胖相关疾病(如2型糖尿病)治疗领域，尤其涉及验证黑苦荞茎叶提取物对2型糖尿病治疗的可行性。

背景技术

研究显示，糖尿病已经成为一种严重威胁人类健康的内分泌代谢性疾病。在糖尿病患者中，II型糖尿病占95％以上。II型糖尿病患者发生结直肠癌、肝癌、乳腺癌等恶性肿瘤的风险显著高于一般人群。胰岛素耐受是导致一种肥胖和易患个体患病如II型糖尿病和心血管疾病的常见原因。

现在治疗糖尿病主要是依赖药物，虽能把血糖控制在较稳定的低水平，但长期服用势必危害人体健康。多数有关机构认为控制糖尿病的有效措施是预防，可通过改变饮食结构以达到预防的目的。因此，开发既具有降血糖作用又对人体无毒或者微毒的天然产物及其有效成分是当务之急。

苦荞属蓼科荞麦属植物，分为普通苦荞和黑苦荞.苦荞是一种独特的药食兼用食物，现代药理研究表明，普通苦荞麦具有降血糖、降血脂、清除自由基抗氧化等功能，对心脑血管系统疾病具有辅助治疗的作用，黑苦荞为四川省川西少数民族地区特有的资源，有“黑珍珠”之美誉，其根、茎、叶、花和果实均含多种氨基酸及微量元素硒、铬等，黑苦荞喜凉爽、耐寒，在我国四川等省的高寒山区具有明显生长优势，资源丰富，其茎叶的生物量高，提取工艺设备完备成熟，经济易得，具有很好的开发价值。

黑苦荞茎叶提取物具有降低糖尿病小鼠血糖的作用。这可能由于黑苦荞中的膳食纤维和黄酮类化合物有抗氧化作用，可改善受损β细胞的功能，但其作用机制仍需进一步研究，通过测定胰岛素受体底物P-IRS-1的蛋白表达水平，再则探测黑苦荞茎叶提取物对小鼠成肌细胞株(C2C12)胰岛素敏感性的影响，为2型糖尿病的治疗提供理论依据。

目前，国内外证实黑苦荞茎叶提取物效果及作用机制是采用野生型、Adipor1-/-、Adipor2-/-、Adipor1-/-Adipor2-/-双敲除小鼠和db/db小鼠做对照实验，通过检测各传导通路活性、相关基因检测，验证黑苦荞茎叶提取物对2型糖尿病的改善作用。黑苦荞茎叶提取物显著降低了甘油三酸酯含量和氧化应激，减少编码促炎细胞因子基因的表达水平。其中 Adipor1-/-、Adipor2-/-、Adipor1-/-Adipor2-/-双敲除小鼠和db/db小鼠来源少、价格昂贵，不适实合实验室推广。我们采用的是廉价的C57BL/6小鼠，通过黑苦芥茎叶提取物对AMPK 所介导的信号通路影响检测来达到同样的效果，适合实验室推广。

发明内容

为了克服Adipor1-/-、Adipor2-/-、Adipor1-/-Adipor2-/-双敲除小鼠和db/db小鼠动 物模型难以实现问题，本发明提前构建2型糖尿病小鼠模型，进一步对小鼠进行各项指标检 测。组织学水平，对比观察普通小鼠对照组(NC)、II型糖尿病小鼠组(DM)、给低剂量黑苦 芥茎叶提取物小鼠组(DM+L)、给高剂量黑苦芥茎叶提取物小鼠组(DM+H)的组织特征；细胞水 平，黑苦芥茎叶提取物改善C2C12细胞胰岛素敏感性；分子水平，对各组小鼠血清中相关指 标进行生化检测，重点监测肝脏中各项相应指标含量，测定各组小鼠血胰岛素含量；基因水平， 检测肝脏中糖代谢相关酶PEPCK mRNA，C2C12细胞中GLUT4mRNA表达的测定；综合检测黑 苦芥茎叶提取物对PI3K/Akt信号通路影响。