[发明专利]一种组培嘎啦苹果苗不定根离体再生不定芽的方法

说明书

本发明公开了一种组培嘎啦苹果苗不定根离体再生不定芽的方法，继代培养扩繁出一定数量的嘎啦苹果组培苗，以嘎啦苹果组培苗为起始材料，诱导生成不定根；将不定根作为主要实验材料，在根诱导芽培养基中进行脱分化形成愈伤组织后，经过再分化生成不定芽。本发明的有益效果是高效的获得苹果植株。

技术领域

本发明属于农业技术领域，涉及一种组培嘎啦苹果苗不定根离体再生不定芽的方法。

背景技术

苹果的组织培养方式比较广泛，近些年研究也比较多，主要包括苹果的茎尖培养、苹果胚培养、胚乳培养、花药培养、原生质体培养与融合等。但能不能利用不定根诱导出芽，还有待进一步研究，根诱导芽不仅是对植物全能性的一个验证，还能用于苹果的遗传转化体系中。

目前，获得苹果转基因植株方法主要是利用根癌农杆菌介导的侵染苹果叶片，及苹果原生质体。转基因效率低，且操作繁琐。根生芽技术，只在一些草本植物，尤其是药用植物有所报道，但是在木本植物的鲜有报道，而我们的实验材料为木本植物苹果，发根农杆菌侵染大多只停留在生根阶段，而我们从根再诱导不定芽意义重大，这一研究可能为苹果遗传转化提供新的思路和理论参考。已知发根农杆菌诱导出的不定根，转化效率高，我们将利用不定根诱导出芽，从而获得转基因苹果植株，来开辟一种高效的苹果遗传转化方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种组培嘎啦苹果苗不定根离体再生不定芽的方法，本发明的有益效果是高效的获得苹果植株。

本发明所采用的技术方案是按照以下步骤进行：

步骤1：继代培养扩繁出一定数量的嘎啦苹果组培苗，以嘎啦苹果组培苗为起始材料，诱导生成不定根；

步骤2：将不定根作为主要实验材料，在根诱导芽培养基中进行脱分化形成愈伤组织后，经过再分化生成不定芽。

进一步，根诱导芽培养基配方：MS+0.22mg/l TDZ+0.186mg/l NAA+30g蔗糖+7g琼脂。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明进行详细说明。

本发明一种组培嘎啦苹果苗不定根离体再生不定芽的方法按照以下步骤进行：

步骤1：继代培养扩繁出一定数量的‘嘎啦’苹果组培苗，以“嘎啦”苹果组培苗为起始材料，诱导生成不定根。

步骤2：将不定根作为主要实验材料，在根诱导芽培养基中进行脱分化形成愈伤组织后，经过再分化生成不定芽。

其中根诱导芽培养基配方：MS+0.22mg/l TDZ+0.186mg/l NAA+30g蔗糖+7g琼脂

以上所述仅是对本发明的较佳实施方式而已，并非对本发明作任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对以上实施方式所做的任何简单修改，等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的范围内。