[发明专利]一种聚酮类化合物及其制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种聚酮类化合物及其制备方法和用途，特点是该聚酮类化合物的结构式如Ⅰ所示，其制备方法步骤包括通过保藏号为CGMCC No.17574的红树林细菌Hahellasp.HK‑22发酵培养获取含有聚酮类化合物的发酵物，然后用乙酸乙酯萃取后蒸干，得粗浸膏；将该粗浸膏经减压硅胶柱层析，凝胶柱层析，中压柱层析和反相半制备高效液相色谱分离纯化得到，优点是该聚酮类化合物具有抗癌作用，可能用于抑制癌细胞增殖作用的新药物成分。

技术领域

本发明涉及一种聚酮类化合物，尤其是涉及一种聚酮类化合物及其制备方法和用途。

背景技术

海洋覆盖着地球70%的面积，因其环境的高盐和缺氧等特点，使得孕育着的许多宏观和微观生物具有独特的新陈代谢途径和生存繁殖方式，从而产生了一系列具有特定活性的次生代谢产物，以确保在多样和恶劣的生境中能够生存。红树林是指能够生长在世界各地热带和亚热带海岸咸水中的树木或灌木，由于长期遭受到海水浸淹，使得生活在这里的生物不仅具有物种的多样性，而且代谢物更具新颖性和复杂性。Hahellasp.是一种海洋特有的细菌，由于其PKS合成酶的表达，促使该类菌株可以产生聚酮类化合物。聚酮类化合物具有抗菌、抗癌、蛋白酶抑制和抗氧化等生理和生物活性。本发明人对红树林来源细菌Hahellasp. HK-22液体发酵的乙酸乙酯提取物进行了抗癌细胞活性实验，发现其有抗癌细胞的活性，遂对其活性成分进行了研究，分离得到了一种新的聚酮类化合物。目前尚未见该化合物的化学结构及其抗癌活性的报道，因此市场上也尚未见有与此相关的药物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种具有抗癌化活性的聚酮类化合物及其制备方法和用途。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：一种聚酮类化合物，该化合物的结构式如Ⅰ所示：

（I）。

上述聚酮类化合物的制备方法，具体包括如下步骤：

（1）发酵生产：将保藏号为CGMCC No.17574 的红树林细菌HK-22划线复活，然后挑一个单菌落接种到ISP₄液体培养基中，在28℃、150 rpm/min条件下，培养3天后作为种子液；再将种子液按体积比1:40接种到ISP₄液体培养基中，于28℃，摇床发酵8天，得到发酵液；

（2）粗浸膏的获得：将发酵液采用与发酵液同体积的乙酸乙酯萃取三次，合并萃取液后减压浓缩除去乙酸乙酯，获得粗浸膏；

（3）化合物的分离纯化：将粗浸膏用体积比为1：1的二氯甲烷和甲醇混合溶剂溶解后，加300‒400目正相硅胶拌样，依次采用采用体积比为5:1的石油醚/乙酸乙酯和体积比为40:1的乙酸乙酯/甲醇为洗脱剂，进行减压硅胶柱层析，收集洗脱组分；然后采用体积比为1：1的二氯甲烷/甲醇为洗脱剂，对收集的组分进行凝胶柱层析，收集洗脱组分；采用洗脱比例为20%‒70%甲醇/水为洗脱剂，对收集的组分进行反相中压柱色谱分离，梯度洗脱150min，流速为20 ml/min，收集出峰时间为65 min的流分；最后采用体积比为35：65的乙腈/水为洗脱剂，将收集的流分经半制备反相高效液相色谱分离纯化得到聚酮类化合物，其结构如式I所示：

（I）。

上述ISP₄液体培养基配方如下：可溶性淀粉10 g，CaCO₃ 2 g，K₂HPO₄ 1 g，MgSO₄•7H₂O 1 g，NaCl 1 g，FeSO₄•7H₂O 0.001 g，MnCl₂•7H₂O 0.001g，(NH₄)₂SO₄ 2g，海盐10 g和纯水1 L。