[发明专利]利用复方红衣补血口服液药渣制备的链霉菌培养基

说明书

本发明属于微生物技术领域，公开了利用复方红衣补血口服液药渣制备的链霉菌培养基，其按照如下工艺制备而得：步骤1）对复方红衣补血口服液药渣进行发酵处理，步骤2）水解制备氮源组分，步骤3）制备链霉菌培养基。该培养基成本低廉，适合链霉菌发酵制备链霉素，降低了企业成本。

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及利用复方红衣补血口服液药渣制备的链霉菌培养基。

背景技术

链霉菌是生产链霉素的主要菌种。链霉素是一种从灰链霉菌的培养液中提取的抗菌素，属于氨基糖甙碱性化合物，是治疗结核杆菌的主要药物。由于链霉素肌肉注射的疼痛反应比较小，适宜临床使用，只要应用对象选择得当，剂量又比较合适，大部分病人可以长期注射。链霉菌发酵法制备链霉素过程中，需要用到培养基，而培养基一般采用酵母膏、葡萄糖等组分，成本高昂；随着近年来原料成本的提升，相关制药企业利润大幅降低，甚至面临亏损的问题。需要研究成本低廉的培养基。

申请人之前的专利技术“一种处理复方红衣补血口服液药渣的环保工艺”，通过对复方红衣补血口服液药渣进行回收利用，选择粪肠球菌-产黄纤维单胞菌的组合方式对复方红衣补血口服液药渣发酵，以降解药渣制备菌体蛋白，其中，处理物中蛋白含量接近30%，纤维素降解率达到40%左右，营养价值较高，适合应用到饲料蛋白中；但是饲料蛋白的附加值较低，申请人继续对处理物进行了进一步研究，以提升应用价值。

发明内容

为了克服现有技术的缺陷，本发明在中国专利“一种处理复方红衣补血口服液药渣的环保工艺”的基础上进行改进，其目的在于提供利用复方红衣补血口服液药渣制备的链霉菌培养基，该培养基成本低廉，适合链霉菌发酵制备链霉素，降低了企业成本。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

利用复方红衣补血口服液药渣制备的链霉菌培养基，其按照如下工艺制备而得：步骤1）对复方红衣补血口服液药渣进行发酵处理，步骤2）水解制备氮源组分，步骤3）制备链霉菌培养基。

进一步地，所述链霉菌培养基按照如下工艺制备而得：

步骤1）对复方红衣补血口服液药渣进行发酵处理：将粪肠球菌种子液按照20%的接种量接种到含有复方红衣补血口服液药渣的发酵原料，发酵24-48h后，再按照20%的接种量接入产黄纤维单胞菌种子液，继续发酵72-96h，得到发酵产物；

步骤2）水解制备氮源组分：将发酵产物置于高速剪切机中剪切，然后以频率为30kHz的超声波处理10-15min，再添加氨水调整pH为7.5，然后添加中性蛋白酶和碱性蛋白酶，100rpm搅拌酶解7-9h，再加热至95℃灭酶5min，然后1000rpm离心3-5min，收集上层液体，即得氮源组分；

步骤3）制备链霉菌培养基：以下组分按照重量百分比计：氮源组分30%，葡萄糖3.0%，硫酸铵0.5%，磷酸二氢钾0.1%，磷酸氢二钾0.1%，七水硫酸镁 0.01%，七水硫酸亚铁0.01%，其余为水。

优选地，所述步骤1）中，整个发酵过程中，控制发酵温度为32℃，每隔2h进行通风搅拌，并且通过鼓热空气吹动水份雾化来增加空气湿度。

优选地，所述步骤2）中，中性蛋白酶和碱性蛋白酶的添加量分别为500U/ml和300U/ml。

优选地，所述剪切速度为10000rpm，剪切时间为120s。

优选地，所述含有复方红衣补血口服液药渣的发酵原料的制备方法为：取药渣处理物40kg，糖蜜10kg，磷酸二氢钾0.1kg，磷酸氢二钾0.1kg，七水硫酸镁0.01kg，七水硫酸亚铁0.01kg，加水定容至100L，搅拌均匀，灭菌，即得。

优选地，所述药渣处理物的制备方法为：将复方红衣补血口服液药渣在无菌条件下，进行挤压脱水至含水量为20%，然后以频率25kHz的超声波处理5min，得到药渣处理物。