[发明专利]一种用于吸附肿瘤细胞的载体，制备方法，试剂盒及应用

说明书

本发明公开了一种用于吸附肿瘤细胞的载体，制备方法，试剂盒及应用，涉及体外诊断技术领域，载体上修饰有硅线，高分子化合物和亲和素，亲和素上桥接有生物素抗体，高分子化合物为聚乙二醇，PLGA和羧甲基壳聚糖中的任意一种。本发明提供的载体通过纳米结构加强了与肿瘤细胞的相互作用，改善了生物相容性，有效减少了血细胞的非特异性吸附。

技术领域

本发明涉及体外诊断技术领域，具体而言，涉及一种用于吸附肿瘤细胞的载体，制备方法，试剂盒及应用。

背景技术

外周血液中的循环肿瘤细胞(ctcs)作为液体活检对癌症诊断或预后的临床意义。在过去十年中，科学家和医生开发了各种设备或生物芯片检测ctcs，从患者血液中，如免疫磁性分离或利用大小，密度，电性能等。但是昂贵的设备或复杂的制造工艺(特别是这些芯片中的微流体)成为廉价血液检测ctcs巨大的障碍。最近，纳米芯片显示出了高效率的ctcs捕获，微尺度地形为癌细胞提供了合适的位置，纳米结构与癌症的大小相符。然而，开发玻璃基生物芯片，提供容易制备且低成本的生物芯片仍然是急需解决的技术问题。

此外，现有的生物芯片多存在生物相容性差，血细胞的非特异性吸附较为严重，严重影响正常的癌症诊断及预后。

鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种用于吸附肿瘤细胞的载体。该载体通过纳米结构加强了与肿瘤细胞的相互作用，改善了生物相容性，有效减少了血细胞的非特异性吸附。

本发明的第二目的在于提供一种用于吸附肿瘤细胞的载体的制备方法。该制备方法工艺简单，成本低，所用设备低廉，具有较为广泛的应用前景。

本发明的第三目的在于提供一种试剂盒。该检测试剂盒可以用于检测循环肿瘤细胞。

本发明的第四目的在于提供一种用于吸附肿瘤细胞的载体在检测循环肿瘤细胞中的应用。

本发明是这样实现的：

一种用于吸附循环肿瘤细胞的载体，载体呈球状或多面体结构，载体为玻璃珠，塑料珠，纳米金珠，高分子球状物和多面体中的任意一种，载体上修饰有用于结合循环肿瘤细胞的抗体；

多面体为四面体，六面体，八面体，十二面体，二十面体和二十四面体中的任意一种，高分子球状物为PLGA和羧甲基壳聚糖中的任意一种。

在本发明应用较佳的实施例中，上述载体上修饰有硅线，高分子化合物和亲和素，亲和素上桥接有生物素，生物素上连接有用于结合循环肿瘤细胞的抗体；

亲和素为卵白亲和素和链霉亲和素的任意一种，高分子化合物为聚乙二醇，PLGA和羧甲基壳聚糖中的任意一种。

在本发明应用较佳的实施例中，上述抗体为生物素EpCAM抗体。

一种载体的制备方法，制备方法具体包括通过桥接使抗体与载体连接。

在本发明应用较佳的实施例中，上述制备方法具体包括先在载体上接枝生长硅纳米线，再将高分子化合物修饰到载体表面上，然后将亲和素与经过高分子化合物修饰的载体混合，最后与连接有抗体的生物素混合。

在本发明应用较佳的实施例中，上述载体上接枝生长硅纳米线具体包括：先用等离子清洗机清洗载体，再向载体中加入PVP溶液，无水乙醇和柠檬酸盐试剂，再加入氨水，最后加入TEOS，保温，制得生长有硅纳米线的载体。

在本发明应用较佳的实施例中，上述将高分子化合物修饰到载体表面具体包括如下步骤：将修饰有硅线的载体与高分子化合物和桥接剂混合，或将载体与由高分子化合物和桥接剂组成的混合试剂混合，避光反应，制得修饰有高分子化合物的载体；