[发明专利]一种猪细小病毒病毒样颗粒的纯化方法及其应用有效
| 申请号： | 201910530218.0 | 申请日： | 2019-06-19 |
| 公开（公告）号： | CN110283236B | 公开（公告）日： | 2021-05-04 |
| 发明（设计）人： | 范娟;丁国伟;李群;潘杰;徐萍;叶正琴;李甜甜;魏荣荣;孙舒;李琛 | 申请（专利权）人： | 扬州优邦生物药品有限公司 |
| 主分类号： | C07K14/015 | 分类号： | C07K14/015;C07K1/18;C12N15/866;A61K39/125;A61P31/20 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 林娟 |
| 地址： | 225000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 种猪 细小 病毒 颗粒 纯化 方法 及其 应用 | ||
1.一种猪细小病毒病毒样颗粒的纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）将表达猪细小病毒病毒样颗粒的培养物进行澄清，收集上清液并进行灭活，以得到半成品；所述表达猪细小病毒病毒样颗粒的培养物的获取包括如下步骤：用嵌合有编码猪细小病毒VP2蛋白基因的杆状病毒感染昆虫细胞，培养昆虫细胞，以得到表达猪细小病毒病毒样颗粒的培养物；
（2）调节半成品的pH值至5.5～6.0；
（3）将调节pH值后的半成品加入到弱阴离子交换柱中，洗脱弱阴离子交换柱，收集各个出峰组分；所述的弱阴离子交换柱为DEAE-阴离子交换柱；使用第一缓冲液平衡弱阴离子交换柱，第一缓冲液为18~20 mM的乙酸钠和0.1~0.3 M的NaCl，第一缓冲液的pH为5.0~5.5；使用第二缓冲液洗脱弱阴离子交换柱，第二缓冲液为18~20 mM乙酸钠和1.0~1.2 M NaCl，第二缓冲液的pH为5.0~5.5。
2.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，步骤（1）中用的病毒灭活剂为二乙烯亚胺。
3.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，培养昆虫细胞时采用无血清培养基，培养温度为25℃～30℃，转速为130rpm～150rpm，培养时间为96h～144h。
4.如权利要求3所述的纯化方法，其特征在于，培养昆虫细胞时采用无血清培养基，培养温度为27℃，转速为140rpm，培养时间为96h～120h。
5.如权利要求1所述的纯化方法，其特征在于，在步骤（3）中，第二缓冲液的体积为弱阴离子交换柱体积的3～5倍。
6.通过权利要求1-5任一所述的纯化方法得到的猪细小病毒病毒样颗粒的疫苗。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于扬州优邦生物药品有限公司，未经扬州优邦生物药品有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910530218.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
