[发明专利]一种利用黑腹果蝇评价邻苯二甲酸酯类增塑剂的生殖毒性的方法

说明书

本发明提供了一种利用黑腹果蝇评价邻苯二甲酸酯类增塑剂的生殖毒性的方法，属于毒性研究技术领域，包括：1)将黑腹果蝇置于含有邻苯二甲酸酯类增塑剂的固体培养基上培养7d～10d，统计得到第11d～第30d子一代蛹的总数量和子一代成蝇的总数量；2)将黑腹果蝇置于固体培养基上培养7d～10d，统计得到第11d～第30d子一代蛹的总数量和子一代成蝇的总数量；3)所述步骤1)和步骤2)的子一代蛹的总数量和子一代成蝇的总数量显著差异，邻苯二甲酸酯类增塑剂具有生殖毒性。本发明的方法准确地评价邻苯二甲酸酯类增塑剂的生殖毒性，为农业上合理使用的邻苯二甲酸酯类增塑剂的剂量和浓度提供理论和实验数据支持。

技术领域

本发明属于毒性研究技术领域，尤其涉及一种利用黑腹果蝇评价邻苯二 甲酸酯类增塑剂的生殖毒性的方法。

背景技术

增塑剂是一种广泛使用的高分子材料添加剂，其中最主要的是邻苯二甲 酸酯类化合物，由于具有无色无味、挥发性低和耐低温等特点，目前被大量 应用于食品包装、家具制造、建筑材料、儿童玩具、化妆品和医疗等方面， 是世界上生产和使用量最大最广泛的合成有机化合物之一。增塑剂存在于日 常生活中，与人体接触密切，因此应进行毒性评价判断其是否存在毒性作用， 以此合理控制增塑剂类物质的使用。

如今物质的毒理学研究发展迅速，发光细菌、藻类、蚤类、两栖类、鱼 类和小鼠等生物已经被广泛应用于各种物质的毒理学研究中，在环境评价、 毒性测试等方面占有一定的地位。其中，发光细菌、藻类及大型蚤类生物的 实验方式单一，作用机制难以推测及分析，毒性影响的结果分析也较为单一； 两栖类和鱼类生物的实验周期较长，操作难度大；小鼠和大鼠为哺乳动物实 验周期长，对污染物的应激反应方式相对复杂，分析难度较大。

目前毒性作用的研究主要集中在植物、水生动物和哺乳动物，相对于陆 生昆虫研究较少。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种利用黑腹果蝇评价邻苯二甲酸酯 类增塑剂的生殖毒性的方法，采用本发明提供的方法能够准确地评价邻苯二 甲酸酯类增塑剂的生殖毒性，为农业上合理使用的邻苯二甲酸酯类增塑剂的 剂量和浓度提供理论和实验数据支持。

为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

本发明提供了一种利用黑腹果蝇评价邻苯二甲酸酯类增塑剂的生殖毒 性的方法，包括以下步骤：

1)将黑腹果蝇置于含有邻苯二甲酸酯类增塑剂的固体培养基上培养， 培养7d～10d，培养结束后将黑腹果蝇的亲代除去，随后每天统计黑腹果蝇的 子一代蛹的数量和子一代成蝇的数量，得到第11d～第30d子一代蛹的总数量 和子一代成蝇的总数量；

2)将黑腹果蝇置于固体培养基上培养，培养7d～10d，培养结束后将黑 腹果蝇的亲代除去，随后每天统计黑腹果蝇的子一代蛹的数量和子一代成蝇 的数量，得到第11d～第30d子一代蛹的总数量和子一代成蝇的总数量；

3)当所述步骤1)的第11d～第30d子一代蛹的总数量、子一代成蝇的 总数量与步骤2)的第11d～第30d子一代蛹的总数量、子一代成蝇的总数量 相比，任一项出现显著差异时，表明邻苯二甲酸酯类增塑剂具有生殖毒性；

所述含有邻苯二甲酸酯类增塑剂的固体培养基中邻苯二甲酸酯类增塑 剂的体积浓度为0.1～1％。

优选的，所述步骤1)和2)黑腹果蝇的数量独立的为18～22对；

所述邻苯二甲酸酯类增塑剂包括邻苯二甲酸二异壬酯。

优选的，所述步骤1)含有邻苯二甲酸酯类增塑剂的固体培养基以水为 溶剂，每升还包括：70～80g玉米面、30～35g酵母、8～12g琼脂、0.5～1g CaCl₂、 30～33g蔗糖、60～65g葡萄糖、1～3g山梨酸钾和15ml 5％对羟基苯甲酸丁酯 溶液。