[发明专利]抗CD73抗体及其应用

说明书

本发明属于生物医药领域，提供一种抗CD73抗体或其抗原结合片段的制备和使用，所述抗体包含H CDR1、H CDR2和H CDR3，以及L CDR1、L CDR2和L CDR3；H CDR1的序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:17所示，H CDR2的序列如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:10或SEQ ID NO:18所示，H CDR3的序列如SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:11或SEQ ID NO:19所示，L CDR1的序列如SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:13或SEQ ID NO:21所示，L CDR2的序列如SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:14或SEQ ID NO:22所示，L CDR3的序列如SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:15或SEQ ID NO:23所示。本发明的抗CD73抗体能够特异性结合CD73，抑制CD73的酶活性。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及抗体的制备和使用。

背景技术

CD73又称胞外-5’-核苷酸酶，是通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定于质膜的一种糖蛋白，广泛表达于人体内皮细胞、淋巴细胞，有助于将具有免疫激活作用的ATP转化为具有免疫抑制作用的腺苷。腺苷作为信号传导分子可由多种受体(包括A1，A2A，A2B及A3)介导其生物学效应，如腺苷与腺苷受体A2AR(adenosine receptor AR)结合可抑制T细胞的免疫作用，进而帮助癌细胞逃逸T细胞的“追杀”。肿瘤细胞也可以表达CD73并释放腺苷，从而降低抗肿瘤活性，除了抑制免疫细胞功能，越来越多的研究表明CD73也可以直接刺激肿瘤细胞增殖，迁移和侵袭，及肿瘤血管生成。由此可见，CD73和其他调节免疫应答的靶点比较，靶向CD73有着“一箭双雕”的优势。

临床前研究表明，靶向CD73能够产生良好的抗肿瘤作用，可通过增加T淋巴细胞和肿瘤白细胞总数改变肿瘤免疫微环境，还可减少肿瘤骨髓源性抑制细胞(MDSC)，使有应答大鼠的巨噬细胞朝着活化(抗肿瘤)表型转变。且将CD73阻断治疗与其它免疫分子调节剂联合(如PD-(L)1抗体)可以显著增强如CD73单抗的抗肿瘤效果，这对增强本企业的抗肿瘤产品线也是极具吸引力的选择。

对临床肿瘤样本的分析显示，CD73高表达是一种潜在的生物标志物，在多种不同的肿瘤上表达，与多种类型肿瘤的不良预后密切相关，包括乳腺癌、肺癌、卵巢癌、肾癌、胃癌、头颈癌等。另外，PD-1/CD73单抗、放化疗等治疗方案可能引起肿瘤微环境CD73表达升高，继而通过腺苷信号抑制免疫反应，使治疗大打折扣，也就是我们常说的获得性耐药。因此，靶向CD73的治疗策略有潜力作为单药或联合疗法应用于临床。

鉴于对靶向疾病(如癌症)的治疗仍有较迫切的改进需求，通过多种机制调控肿瘤进展的方法以及调控CD73活性的方法及相关治疗剂是非常令人期望的。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗CD73抗体或其抗原结合片段，所述抗体或其抗原结合片段特异性识别并结合CD73，并且具有预期功能特性，这些特性包括高亲和力结合至CD73并且抑制CD73酶活性的能力。本文所述的抗体可用于抑制肿瘤生长，减少腺苷产生，刺激免疫反应及检测样品中的CD73蛋白。

在第一个方面，本发明提供抗CD73抗体或其抗原结合片段，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，其中，所述重链可变区包含H CDR1、H CDR2和H CDR3，所述轻链可变区包括L CDR1、L CDR2和L CDR3；

所述H CDR1的序列如SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:17所示，或者所述HCDR1的序列与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:17有95％以上，如96％、97％、98％、99％的序列一致性；