[发明专利]喷雾干燥制备拮抗酵母固体制剂的方法

说明书

本发明属于食品生物技术领域，具体涉及一种喷雾干燥制备拮抗酵母固体制剂的方法；步骤如下：首先进行拮抗酵母的活化培养以及菌体的收集；称取保护剂，加入生理盐水中，然后在水浴条件下搅拌溶解，得到保护剂溶液；优选保护剂为阿拉伯胶和海藻糖；再将离心收得的菌体与保护剂溶液混合，在28℃条件下振荡后，得到混合液；设置喷雾干燥机的雾化器压强和进风温度，待出风温度达到80℃时，打开空气压缩机，调整蠕动泵的进料速率，以混合液作为原料进行进料，经喷雾干燥后，得到固体制剂；本发明喷雾干燥过程中，可以利用保护剂包覆拮抗酵母，提高存活率；同时具有干燥速率快和时间短的优点，可应用于桃果软腐病的控制，具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于食品生物技术领域，具体涉及一种喷雾干燥制备拮抗酵母固体制剂的方法。

背景技术

膜醭毕赤酵母被认为是安全的酵母之一，且经急性毒性试验证明为安全无毒类，对桃果采后由匍枝根霉(Rhizopusstolonifer)引起的软腐病及自然腐烂均有显著的控制效果，因此在桃果采后病害的生物防治中具有良好的应用前景。在实际应用过程中，拮抗酵母极易受环境的影响而出现活力降低等情况，这也是制约生物防治实际应用的一个重要因素，因此高活力拮抗酵母制剂的制备显得尤为关键。但是到目前为止，国际上只有少数几种拮抗酵母制剂产品上市，而我国还未实现拮抗酵母制剂的商业化生产和应用。拮抗酵母制剂要真正应用到实际生产中，除了要求拮抗菌株具有稳定的遗传性和较强的适应力能力之外，还需要克服以下的困难：(1)提高实际应用中的生防效力；(2)在保证生防效力的前提下，最大限度的降低成本；(3)具备较长的贮备期限；(4)对多种果蔬的采后病害具有控制效果。

目前，拮抗酵母制剂主要有液体和固体两种形式。虽然拮抗酵母液体制剂的制备相对简单，但由于在运输和保存过程中，拮抗酵母活力易受环境影响而下降，因此制备拮抗酵母的固体制剂对其应用尤为重要。喷雾干燥是一种常用于将溶液、乳液和悬浮液快速干燥成固态产品的方法，具有干燥速率快和时间短(一般为15～40s)，工艺简单和可连续化生产等优点。与其他干燥方式如低温冷冻干燥法相比，喷雾干燥有着更高的干燥效率和更快的干燥速度，干燥的产品脱水彻底、质量轻、便于运输和贮藏，且低温冷冻干燥费用比喷雾干燥高6～10倍。喷雾干燥过程中，可以利用保护剂包覆活性微生物，使微生物本体与外界环境隔离，增强其抵抗氧、热等不良刺激的能力，从而提高微生物的存活率，所制备的固体制剂一般能在低温或常温条件下保存较长时间。但是目前，关于利用喷雾干燥制备膜醭毕赤酵母固体制剂的研究方法尚未见报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种利用喷雾干燥方法制备膜醭毕赤酵母(Pichiamembranaefaciens)固体制剂，在喷雾干燥过程中，可以利用保护剂包覆拮抗酵母，从而提高其的存活率具有潜在的应用价值。

为了实现上述目的，按照下述步骤进行：

(1)拮抗酵母的活化培养以及菌体的收集；

(2)称取保护剂，加入生理盐水中，然后于一定温度条件下水浴搅拌溶解，得到保护剂溶液；所述保护剂包括保护剂A和保护剂B或保护剂A；保护剂A为阿拉伯胶、脱脂乳粉或酪蛋白酸钠的任意一种；保护剂B为β-环糊精、麦芽糊精、海藻糖的任意一种；

(3)将步骤(1)中离心收得的菌体与步骤(2)得到的保护剂溶液混合，在一定温度条件下振荡后，得到混合液；

(4)设置喷雾干燥机的雾化器压强和进风温度，待出风温度达到一定温度时，打开空气压缩机，调整蠕动泵的进料速率，然后以步骤(3)得到的混合液作为原料进行进料，经喷雾干燥后，得到固体制剂。

优选的，步骤(1)中所述拮抗酵母的活化培养以及菌体的收集的具体步骤为：将拮抗酵母接种于NYDA培养基上在28℃条件下培养2d；分别挑取2环培养后的酵母菌接种于50mL的NYDB培养基中，在28℃、180r/min振荡培养20h得到培养液，然后将培养液于8000r/min离心15min，弃上清，收集得到菌体。