[发明专利]快速检测水中大肠埃希氏菌的方法在审
| 申请号： | 201910538317.3 | 申请日： | 2019-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN112111584A | 公开（公告）日： | 2020-12-22 |
| 发明（设计）人： | 刘刚;陆韻 | 申请（专利权）人： | 清华大学 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/10;C12N15/11;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京清亦华知识产权代理事务所(普通合伙) 11201 | 代理人： | 赵天月 |
| 地址： | 10008*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 快速 检测 水中 大肠 埃希氏菌 方法 | ||
1.一种用于检测水中大肠埃希氏菌的引物组，其特征在于，包括：
SEQ ID NO：1～6所示的核苷酸序列。
2.一种检测水中大肠埃希氏菌的方法，其特征在于，包括：
提取水中的总DNA；
利用权利要求1所述引物组分别对所述总DNA和超纯水进行扩增，以便得到样品产物和对照产物；
将所述样品产物与对照产物进行比对，以便确定所述水中是否存在大肠埃希氏菌。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述扩增是采用环介导等温扩增方式进行的。
4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述比对是通过下列方式进行的：
以SYBR Green I染料对所述样品产物和对照产物进行染色；
所述样品产物染色后呈绿色，对照产物染色后呈橙红色，是所述水中存在大肠埃希氏菌的指示；所述样品产物和对照产物染色均呈橙红色，是所述水中不存在大肠埃希氏菌的指示。
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述扩增是在荧光定量PCR仪上进行的，通过对扩增结果进行分析，以便确定水中大肠埃希氏菌含量。
6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述扩增反应体系如下：
WarmStart LAMP 2×预混液12.5μl，LAMP 50×荧光染料0.5μl，LAMP引物2.5μl，模板2μl，超纯水7.5μl，反应温度为65℃，时间为45min。
7.一种用于检测水中大肠埃希氏菌的试剂盒，其特征在于，包括：权利要求1所述的引物组。
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