[发明专利]一种外泌体分离与表面蛋白检测微流控装置及使用方法有效
申请号: | 201910540546.9 | 申请日: | 2019-06-21 |
公开(公告)号: | CN110339874B | 公开(公告)日: | 2021-05-11 |
发明(设计)人: | 毛红菊;陆赟星;王琨;程祖乐;赵建龙 | 申请(专利权)人: | 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 |
主分类号: | B01L3/00 | 分类号: | B01L3/00;G01N33/543;G01N33/58;G01N33/68 |
代理公司: | 上海泰能知识产权代理事务所(普通合伙) 31233 | 代理人: | 黄志达;魏峯 |
地址: | 200050 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 外泌体 分离 表面 蛋白 检测 微流控 装置 使用方法 | ||
1.一种外泌体分离与表面蛋白检测微流控装置的使用方法,包括:
(1)将实验样品组依次正向导入微流控芯片中进行受控分离与孵育标记;其中,所述微流控装置依次连接有进样泵、微量注射器、设有磁铁的微流控芯片以及废液收集器,所述微流控芯片包括外泌体分离区域与检测区域;分离区域包括进样口、蛇形通道和圆形孵育腔体;检测区域包括微柱阵列和出样口;分离区域和检测区域通过通道连接;所述磁铁设置在圆形孵育腔体上下方;所述实验样品组包括捕获磁珠、待测样本以及量子点检测探针;
(2)待实验样品组顺次导入微流控芯片并孵育标记后,导入洗液对微流控芯片进行冲洗;然后改为负压抽取;
(3)在显微镜下实时观测明场与荧光场下免疫复合物的排布情况与量子点发光强度,分析辨别实验中对于不同样品的蛋白表达,并通过显微拍摄与软件分析来测量荧光强度。
2.根据权利要求1所述的使用方法,其特征在于:所述步骤(1)中的微流控芯片由盖玻片基底与PDMS芯片键合而成。
3.根据权利要求1所述的使用方法,其特征在于:所述步骤(1)中的进样口通过逐渐减小的过渡区域与蛇形通道相连。
4.根据权利要求1所述的使用方法,其特征在于:所述步骤(1)中的微柱阵列最后一排设有拦截柱。
5.根据权利要求1所述的使用方法,其特征在于:所述步骤(1)中的导入流速为1μl/min-2μl/min。
6.根据权利要求1所述的使用方法,其特征在于:所述步骤(2)中的负压抽取流速为10-30ml/h。
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