[发明专利]一种铀酰离子的检测方法

权利要求书

1.一种溶液中铀酰离子浓度的检测方法，包括如下步骤：

(1)制备铀酰离子特异性DNA酶和DNA分子发夹修饰的金纳米粒子；

(2)将含铀酰离子的试样溶液加入步骤(1)制备的铀酰离子特异性DNA酶链及其底物链的溶液中进行剪切反应；

(3)将步骤(2)所得溶液加入到DNA复合物和燃料链混合溶液中；

(4)将步骤(3)所得溶液加入到步骤(1)制备的发夹修饰的金纳米粒子溶液中，并加入5mM MgCl₂；

(5)检测步骤(4)所得溶液的荧光信号，并利用标准曲线得出试样溶液中铀酰离子的浓度，

其中，

所述铀酰离子特异性DNA酶序列为：DNA酶链

5’-CACGTCCATCTCTGCAGTCGGGTAGTTAAACCGACCTTCAGACATAGTGAGT-3’；

DNA底物链:5’-CTTCTACAACT-CACTATrAGGAAGAGATGGACGTG-3’，

所述DNA分子发夹序列为:

5’-HS-TTGTGACAGCGAAGCAGGCCGAGCCTAGTTTTTTTTTCTGrATCGCATTTCTACA AAAAC-FAM-3’，

所述DNA复合物序列为:R:5’-GGTAGAAATGGTCTGTCACAATTACGCAGCGA-3’；

P:5’-TATTCGGCCGGCACCCATGTGAGAGAACTTCTACAACT-3’；

Q：5’-ATAGTGAGTTGTAGAAGTTCTTCGCTGCGTAATTGTGACA GACCA-3’，

所述燃料链为序列为:

5’-TGGTCTGTCACAATTACGCAGCGAAGAACTTCTACAACT-3’。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(2)具体为：将100nM铀酰离子特异性DNA酶的底物链和100nM铀酰离子特异性DNA酶链加热至90℃并在含有300mM NaCl的pH值为5.5的10mM MES缓冲液中缓慢冷却，然后加入含铀酰离子的试样溶液用于DNA酶剪切反应，室温下20分钟。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于步骤(3)具体为：将步骤(2)所得溶液加入到50nM DNA复合物和燃料链中，在25℃，pH值为7.5的25mM Tris-HCl缓冲溶液中加入0.1MNaCl，反应60分钟。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于步骤(4)的孵育时间为5小时。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于步骤(5)中荧光信号为500nm至600nm测量荧光信号。