[发明专利]一种HPLC法定量检测拉考沙胺注射液含量的方法

说明书

本发明公开了一种HPLC定量检测拉考沙胺注射液含量的方法。所述HPLC中，流动相由乙腈‑甲醇‑水组成，采用等度洗脱。该方法中拉考沙胺在20～200μg/ml范围内线性关系良好。方法中实验材料易得，流动相简单，检测方法专属性强、灵敏度高、稳定、可靠，可用于拉考沙胺注射液的含量测定及质量控制，给生产过程和用药安全提供有益的参考。

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及一种HPLC法定量检测拉考沙胺注射液含量的方法。

背景技术

本品为无色的澄明液体，是一个新的抗癫痫药物，可单独用于治疗成人癫痫部分发作患者，欧盟和FDA分别于2008年8月与2008年10月批准用于年龄≥16岁(欧盟)/17岁(FDA)部分发作癫痫患者的辅助治疗。拉考沙胺属新一类功能性氨基酸，可通过降低钠离子通道的过度活性来控制神经细胞活性，从而达到控制癫痫发作的目的。目前，全球范围内有关拉考沙胺生物样本和原料药的检测已经被报道和应用，但拉考沙胺作为注射剂的含量检测均未见报道。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供了一种简便、快速、准确的检测拉考沙胺注射液含量的方法，此法可用于拉考沙胺注射液的含量测定及质量控制，给生产过程和用药安全提供有益的参考。

一种HPLC定量检测拉考沙胺注射液含量的方法，包括步骤(1)样品制备，(2)标准曲线制备，(3)采用HPLC检测拉考沙胺注射液含量。

所述(1)样品制备的步骤包括：精密量取本品1mL(约相当于拉考沙胺10mg)，置50mL量瓶中，用流动相定容至刻度，摇匀，精密量取5mL，置10mL量瓶中，用流动相定容至刻度，摇匀，0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液。

所述(2)标准曲线制备的步骤包括：分别精密量取拉考沙胺对照品贮备液50，150，250，375，500μl，流动相适量，到终体积为1000μl，制成标准曲线溶液，采用(3)HPLC的方法检测，记录每个浓度的拉考沙胺对应的峰面积；以拉考沙胺峰面积为纵坐标，以拉考沙胺的浓度为横坐标X，制备拉考沙胺的线性回归方程。

所述步骤(3)采用HPLC检测的步骤包括：

(a)液相色谱条件色谱柱：C18柱；流动相：乙腈-甲醇-水。

所述(a)液相色谱条件中，色谱柱：C18柱；样品检测时间：14min；流速：1.0ml/min；进样量：20μl；柱温：30℃。

所述拉考沙胺对照品贮备液：精密称取拉考沙胺标准品20mg，置50mL量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，得拉考沙胺含量约为400μg/ml对照品储备液。

本发明建立了HPLC法用于拉考沙胺注射液含量的测定，并对其进行方法学验证，结果表明，所建立的方法符合中国药典2015版《药品质量标准分析方法验证指导原则》的要求，方法中实验材料易得，流动相简单，检测方法专属性强、灵敏度高、稳定、可靠，可用于拉考沙胺注射液的含量测定及质量控制，给生产过程和用药安全提供有益的参考。

附图说明

图1流动相(稀释剂)色谱图。

图2溶液4色谱图。

图3供试品溶液色谱图。

具体实施方式

下面结合具体实施例和附图对本发明的技术方案作进一步的详细说明。下述内容仅用于说明本发明，但本发明不局限于此。

1仪器与试剂