[发明专利]一种冬虫夏草多糖提取物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种冬虫夏草多糖提取物，其中，所述提取物中总糖含量为85％-90％，包含低分子量多糖和高分子量多糖，所述低分子量多糖为平均分子量为6.5kDa-7.0kDa的多糖，以质量计占总糖的75％±5％，所述高分子量多糖的平均分子量大于670kDa，以质量计占总糖的25％±5％；

所述冬虫夏草多糖提取物通过如下步骤制备：

(1)将冬虫夏草用水在80℃-100℃下加热提取得到提取液，将提取液用HP-20大孔树脂吸附，并用水洗脱获得水提物；其中，加热提取为回流提取，加热提取的料液比为1:8-1:12kg/L，提取2-4小时；

(2)向步骤(1)中获得的水提物中加入乙醇进行醇沉得到醇沉粗多糖；其中所述水提物为料液比为1:3-1:6 g/mL的水提物水溶液；所述乙醇为无水乙醇，所述无水乙醇与水提物水溶液的体积比为3:1-5:1；

(3)将步骤(2)获得的醇沉粗多糖按照料液比1:18～1:22 g/mL 溶于水中得到粗多糖溶液，之后按照粗多糖溶液与Sevag试剂的体积比为3:1～5:1加入Sevag试剂进行脱蛋白，得到脱蛋白后的粗多糖；以及

(4)将步骤(3)获得的脱蛋白后的粗多糖用AB-8大孔树脂进行脱色素，用水洗脱得到洗脱液，浓缩，并用2kDa透析袋纯水透析得到透析后的透析袋内溶液，所述透析袋内溶液经冷冻干燥得到冬虫夏草多糖提取物。

2.根据权利要求1的冬虫夏草多糖提取物，所述低分子量多糖的平均分子量为6.86kDa。

3.根据权利要求1的冬虫夏草多糖提取物，经凝胶色谱分析显示在保留时间9.610分钟，12.225分钟和17.705分钟共显示三个峰，分别对应分子量大于670kDa占3.328％；分子量大于670kDa占21.849％；以及分子量为6.86kDa占74.829％。

4.权利要求1-3任一项所述冬虫夏草多糖提取物的制备方法，包括如下步骤：

(1)将冬虫夏草用水在80℃-100℃下加热提取得到提取液，将提取液用HP-20大孔树脂吸附，并用水洗脱获得水提物；其中，加热提取为回流提取，加热提取的料液比为1:8-1:12kg/L，提取2-4小时；

(2)向步骤(1)中获得的水提物中加入乙醇进行醇沉得到醇沉粗多糖；其中所述水提物为料液比为1:3-1:6 g/mL的水提物水溶液；所述乙醇为无水乙醇，所述无水乙醇与水提物水溶液的体积比为3:1-5:1；

(3)将步骤(2)获得的醇沉粗多糖按照料液比1:18～1:22 g/mL 溶于水中得到粗多糖溶液，之后按照粗多糖溶液与Sevag试剂的体积比为3:1～5:1加入Sevag试剂进行脱蛋白，得到脱蛋白后的粗多糖；以及

(4)将步骤(3)获得的脱蛋白后的粗多糖用AB-8大孔树脂进行脱色素，用水洗脱得到洗脱液，浓缩，并用2kDa透析袋纯水透析得到透析后的透析袋内溶液，所述透析袋内溶液经冷冻干燥得到冬虫夏草多糖提取物。

5.根据权利要求4所述的方法，所述步骤(1)中，所述加热提取后的残渣继续按照料液比为1:8-1:12 kg/L进行回流提取2-3次，每次提取2-4小时，合并提取液。

6.根据权利要求4所述的方法，所述步骤(2)中水提物为料液比为1:5 g/mL的水提物水溶液；所述步骤(2)中乙醇为无水乙醇，所述无水乙醇与水提物水溶液的体积比为4:1。

7.根据权利要求4所述的方法，所述步骤(2)中醇沉在室温下进行，醇沉时间大于8小时。

8.根据权利要求4所述的方法，所述步骤(3)中粗多糖溶液与Sevag试剂的体积比为4:1。

9.根据权利要求4所述的方法，在步骤(4)之前重复进行步骤(3)直至离心后的水相层与有机相间无蛋白层，得到脱蛋白后的水相层溶液作为脱蛋白后的粗多糖。