[发明专利]一种人胎盘提取液的病毒灭活方法

说明书

本发明公开了一种人胎盘提取液的病毒灭活方法，包括如下顺序进行的步骤：1)采用Trizol RNA抽提试剂提取牛胰腺的总RNA；2)牛胰腺的总RNA的RT‑PCR扩增；3)克隆制备牛核糖核酸酶A的表达细菌；4)牛核糖核酸酶A固定5)胎盘提取液病毒核酸酶解灭活。本发明方法采用基因工程技术，克隆和高效表达RNA酶，并将RNA酶固定化，使胎盘提取液通过固定化RNA酶，使得胎盘提取液中的病毒粒子的核酸被特异性的酶解而失活，达到纯化胎盘提取液的目的，本发明方法高效、高选择性、催化反应条件温和、无污染、低成本、容易操作、酶可以反复利用，产品单一。

技术领域

本发明涉及一种胎盘的消毒方法和由该方法制备的胎盘提取液，特别涉及一种应用化学物质进行的消毒方法。

背景技术

人类在战胜疾病和防止过早衰老的探索中，很早就发现了一种能够防止疾病和延缓衰老的特殊药物—紫河车即：胎盘。胎盘是母体和胎儿间进行物质交流的器官，是胚胎与母体组织的结合体。胎儿在母体内生长发育所需的营养物质全部来自胎盘，同时，母体的一些病毒如风疹、肝炎、艾滋病毒等也会通过胎盘传播给胎儿。所以，胎盘是一个营养和病毒可能同时存在的组织。

病毒是一类个体微小，无完整细胞结构，含单一核酸(DNA或RNA)型，必须在活细胞内寄生并复制的非细胞型微生物，由蛋白质和核酸组成。

病毒体积非常微小，结构极其简单，具有高度的寄生性，完全依赖宿主细胞的能量和代谢系统，获取生命活动所需的物质和能量，离开宿主细胞，她只是一个大的化学分子，停止活动，可制成蛋白质结晶，为一个非生命体，遇到宿主细胞它会通过吸附、进入、复制、装配、释放子代病毒而显示典型的生命体特征，所以病毒是介于生物与非生物的一种原始的生命体。

病毒虽然不具有完整的细胞结构，但是病毒同所有生物一样，具有遗传、复制、变异、进化等生命特征。病毒根据其遗传物质组成及其复制方式分为DNA病毒、RNA病毒、反转录病毒。其中DNA病毒很少，基本上都是RNA病毒。DNA病毒只要细胞表面有合适的受体，就能够通过胞吞或膜融合的方式进入细胞；RNA病毒的遗传信息保存在RNA上，因此复制过程通常发生在细胞质中。RNA病毒是用其自身的RNA复制酶来对基因组进行复制；反转录病毒基因组的复制是采用反转录的方式来完成的，即利用RNA模板来合成DNA。遗传物质为RNA的反转录病毒以DNA为中间物来复制其基因组，而遗传物质为DNA的反转录病毒则以RNA为中间物来复制。反转录病毒常常可以将通过反转录合成的DNA整合到宿主细胞的基因组中。

虽然胎盘具有抑制皮炎及抗过敏；溶解老化的角质、美化肌肤；修复受损的器官及皮肤组织；增强生理功能、提高免疫力，制造抗体；调节和平衡内分泌，延长青春期；增加微循环，提高新陈代谢水平等，被称为“神秘万能药”，对人类防治疾病，提高健康水平，消除亚健康状态，延长生命和提高生命(生活)质量等功能，但是由于胎盘中可能含有病毒，胎盘可能会对使用者的健康造成危害。因为胎盘在随胎儿离开母体的过程中，很可能会受到多种具有传染性的病毒的污染，艾滋病、梅毒、乙型肝炎等病毒都可以它能够通过胎盘传播，而且有一些病毒在沸水中不能被杀死。因此对胎盘中可能存在的病毒进行灭活具有重要的意义。

国内外已研究开发出一些血液病毒灭活技术，如巴斯德液态加热法、有机溶剂，清洁剂法、光敏剂(如亚甲蓝)，光照法和紫外线/补骨脂法。但现有血液制品中病毒灭活技术，大多只能灭活脂包膜病毒等，而对非脂包膜病毒无效。世界上已发现了能在124℃的高温条件下生长的细菌，大量的实验结果表明DNA在100℃的条件下不会断裂。世界上现有的病毒灭活技术的原理，不是特异性地针对病毒核酸，因此对病毒核酸的作用较小。

因此，只有加强胎盘筛查与加强灭活病毒相结合，才能达到胎盘使用安全的目的。鉴于目前灭活病毒的方法的局限性、胎盘中可能存在未知病毒、目前病毒灭活效果的评价的不准确性等原因，寻求和开发一种理想的崭新的病毒灭活方法，就具有非常重要的意义。

发明内容