[发明专利]植物生产口服重组人粒细胞集落刺激因子在审
| 申请号： | 201910549692.8 | 申请日： | 2019-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN110218249A | 公开（公告）日： | 2019-09-10 |
| 发明（设计）人： | 王跃驹;陈书元;张月恒 | 申请（专利权）人： | 王跃驹 |
| 主分类号： | C07K14/535 | 分类号： | C07K14/535;C12N15/82 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 刘颖 |
| 地址： | 美国俄勒冈州，科瓦利斯*** | 国省代码： | 美国;US |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组人粒细胞集落刺激因子 植物生产 胶囊 重组蛋白质生产 生物活性测试 生物活性物质 生物技术领域 表达体系 常温保存 蛋白杂交 活性蛋白 活性物质 平台技术 生物活性 有效表达 冻干 降糖 生菜 生产 叶片 成功 | ||
1.植物作为宿主生产重组人粒细胞集落刺激因子的应用；所述植物选自生菜、菠菜、番茄、萝卜、白菜、玉米、大豆、小麦或烟草；所述植物的器官选自种子、叶、根茎或整株植物。
2.一种表达载体，其特征在于，包括重组人粒细胞集落刺激因子的核苷酸序列以及叶绿体表达载体。
3.根据权利要求2所述的表达载体，其特征在于，所述重组人粒细胞集落刺激因子的序列为将重组人粒细胞集落刺激因子的密码子优化为植物偏好的密码子，获得优化序列。
4.根据权利要求3所述的表达载体，其特征在于，所述优化序列如SEQID No.2所示；
所述重组人粒细胞集落刺激因子的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
5.根据权利要求2至4任一项所述的表达载体，其特征在于，其构建方法包括如下步骤：
步骤1：将重组人粒细胞集落刺激因子的密码子优化为植物偏好的密码子，获得优化序列；
步骤2：将步骤1获得的所述优化序列克隆到pUC57载体中，获得pUC57-CSF。
6.根据权利要求2至6任一项所述的表达载体在表达重组人粒细胞集落刺激因子中的应用。
7.一种植物作为宿主表达重组人粒细胞集落刺激因子的方法，其特征在于，将如权利要求2至5任一项所述的表达载体用基因枪轰击叶片，在植物叶绿体中表达后获得再生植株，将植物叶片冻干粉碎，灌装胶囊，制成重组人粒细胞集落刺激因子。
8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述植物选自生菜、菠菜、番茄、萝卜、白菜、玉米、大豆、小麦或烟草；所述植物的器官选自种子、叶、根茎或整株植物。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述基因枪轰击包括如下步骤：
步骤1：准备转化用载体
步骤2：准备微粒子弹；
步骤3：基因枪轰击；
步骤4：转换后培养、再生为植株。
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