[发明专利]一种深海微生物来源壳聚糖酶CsnA1及其应用

说明书

本发明涉及一种深海微生物来源壳聚糖酶CsnA1及其应用。所述壳聚糖酶CsnA1氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供一种壳聚糖酶CsnA1的发酵和纯化方法，发酵液酶活力高达379.9 U/mL，一步纯化纯度95%，回收率为93.7%。本发明所述壳聚糖酶CsnA1具有嗜冷特性，最适反应温度为25℃，在0℃，10℃，15℃下检测活性可达到最适反应温度下的67.6%，81.5%和89.3%。所述壳聚糖酶CsnA1降解主产物壳二糖和壳三糖，具有良好的应用潜质。

技术领域

本发明涉及一种深海微生物来源壳聚糖酶CsnA1及其应用，属于生物技术领域。

背景技术

壳聚糖(chitosan)是由自然界广泛存在的几丁质(chitin)经过脱乙酰作用得到的，化学名称为聚葡萄糖胺(1-4)-2-氨基-B-D葡萄糖。小分子的壳聚糖降解产物壳寡糖具有广泛的抑菌、抗炎、抗肿瘤作用，被公认为有效的保健功能食品，被誉为“生命的第六元素”。壳寡糖极易溶于水，在医药、保健品、功能食品等领域比大分子壳聚糖有更大的应用价值。

相比传统的酸解法，利用壳聚糖酶生物酶法降解大分子壳聚糖具有反应条件温和、降解产物单一、反应过程容易控制、环境友好等优势，逐渐成为壳寡糖制备过程中的主流方法。但是，目前市场上销售的壳聚糖酶价格昂贵、活力较低，品种单一，无法满足特定条件下的应用，因此急需开发新的壳聚糖酶。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供了一种深海微生物来源壳聚糖酶CsnA1及其制备方法。本发明所述壳聚糖酶CsnA1产量高达379.4 U/mL，一步纯化纯度95%，回收率为93.7%。本发明所述壳聚糖酶CsnA1具有嗜冷特性，最适反应温度为25 ℃，在0 ℃，10 ℃，15℃下检测活性可达到最适反应温度下的67.6%，81.5%和89.3%。所述壳聚糖酶CsnA1降解主产物壳二糖和壳三糖，具有良好的应用潜质。

一方面，本发明提供一种新型壳聚糖酶CsnA1，其氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示。

SEQ ID NO.1：

AGHYAAGALFGPSKAAAASPDDNFSPEALQFLRNNAGLDGEQWNNIMKLINKPEQDDLNWIKYYGYCEDIEDERGYAIGLFGAAAGGSRDAHPDGPDLFKAYDAAKGASNPSADGALKRLGINGKMKGSILEIKDSEKVFCGKIKKLQNDAAWRKAMWEAFYNVYIRYSVEQARQRGFASAVAIGSFVDAALNQGAAGGSDALQGLLARSGSSSNEKAFMKNFHAKRALVVDANKYNKPPNGKNRVKQWDALVDMGKMNLKNVDSEIAQVADWEMK

另一方面，本发明还提供一种壳聚糖酶CsnA1对应的核酸序列，如SEQ ID NO.2所示。

SEQ ID NO.2：